在单克隆抗体制备过程中,有两次筛选过程,第一次是使用选择性培养基选出杂交瘤细胞;第二次就是进一步选出能产生我们需要的抗原特异性抗体的杂交瘤细胞。 利用杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本原理是根据以下三个原则: 1、一种淋巴细胞克隆只产生一种抗体; 2、细胞融合...
淋巴细胞与骨髓瘤细胞发生融合而形成杂交瘤细胞能够存活下来。未融合的骨髓瘤细胞和未融合的 B 淋巴细胞均不能存活。形成的杂交瘤细胞系,既有骨髓瘤细胞大量增殖和永生的特性,又具有免疫 B 细胞合成和分泌特异性抗体的能力。 由于每个杂交瘤细胞由一个 B 细胞融合而成,每个 B 细胞仅识别一种抗原表位,故经筛选和...
置5%~7%CO2,37℃,饱和湿度的培养箱中培养,约培养2周,融合的细胞繁殖形成集落(克隆),接着,用酶联免疫吸附试验(ELISA)或放射免疫试验(RIA)等敏捷方法检测培养液中有无分泌的特异性抗体,将产生特异性抗体孔的杂交瘤细胞移到24孔培养板中扩大增殖,进行克隆化,再扩大增殖,这样便可建立能分泌单克隆抗体的杂交...
杂交瘤细胞制备单克隆抗体的基本原理是将体外免疫的B细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞,使其继承了B细胞产生抗体的能力和骨髓瘤细胞的不死性,从而长期稳定的产生单克隆抗体。 二、流程 制备单克隆抗体的流程主要分为以下五个步骤: 1. 免疫动物:将抗原注射于小鼠等哺乳动物体内,诱导其产生抗体。 2. 分离B细胞:从...
本文将简述利用杂交瘤细胞制备单克隆抗体的基本原理。 制备方法 制备单克隆抗体的方法主要分为以下两步: 1. 免疫原注射小鼠,用于产生B细胞; 2. 将B细胞与癌细胞杂交,获得对免疫原高度敏感的单克隆抗体。 免疫原注射 1.将免疫原直接注入小鼠的腹膜或肌肉组织中,使其产生免疫反应,产生抗体; 2.等待一定时间,采集...
原理:细胞融合。用单克隆抗体的制备流程及方法。流程:将有用抗原免疫过的淋巴细胞与骨髓瘤用PEG进行杂交融合。1)把融合的细胞在HAT培养基上选择出来。2)将选择后的整合细胞分散,培养成杂交瘤细胞。3)使能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞克隆化。4)杂交瘤细胞抗体的性状的鉴定。5)单克隆抗体的大量制备...
单克隆抗体制备过程中,有两次筛选过程,第一次是选出杂交瘤细胞(用HAT选择培养基),第二次是进一步选出能产生我们需要的抗体的杂交瘤细胞。 第一次筛选的原理和方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键。普遍采用的HAT选择性培养液是...
单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与B细胞融合,经过选择培养基筛选后得到杂交瘤细胞,经专一抗体检测后培养能够产生特定的抗体的杂交瘤细胞即可获得单克隆抗体的技术。该技术涉及细胞融合技术和动物细胞培养技术。 【详解】 A、杂交瘤细胞的制备利用了细胞膜的流动性,但不涉及基因重组,A错误; B、诱导细胞融合通常有物理法...
单克隆抗体系体例备进程中,有两次筛选进程,第一次是选出杂交瘤 细胞(用选择造就基),第二次是进一步选出能产生我们须要的抗体的杂 交瘤细胞. 第一次筛选的道理和办法: 细胞融会后,杂交瘤细胞的选择性造就是第一次筛选的症结.广泛采 取的HAT选择性造就液是在通俗的动物细胞造就液中家次黄嘌呤.氨基 ...
(1)细胞融合的原理是___,诱导动物细胞融合特有的方法是___。 (2)选择免疫B细胞是因为其___,且使杂交瘤细胞能在HAT培养液中生存。杂交瘤细胞制备利用了骨髓瘤细胞的___特点。杂交瘤细胞具备两种细胞的优势。 (3)利用杂交瘤细胞生产___抗体,还需要进一步的多次筛选,原因是___。 (4)将最终获得的杂交瘤细胞...