制备方法:将目的基因插入到载体质粒的克隆位点获得可用于蛋白表达的重组质粒;将重组质粒转化至感受态细胞中进行诱导表达。本发明中的抗体‑转座酶融合蛋白,在原位对靶蛋白进行识别,将Tn5锚定在靶蛋白处,同时与Tn5连接的adaptor上加有特定的barcode序列,实现与抗体的对应,从而同时标记多个靶蛋白,并可以彼此区分,可用于...
本发明公开了一种抗体转座酶融合蛋白及其制备方法和应用,抗体转座酶融合蛋白包括His蛋白,TEV蛋白,抗体蛋白和Tn5蛋白,His蛋白依次与TEV蛋白,抗体蛋白和Tn5蛋白通过linker蛋白进行融合连接.制备方法:将目的基因插入到载体质粒的克隆位点获得可用于蛋白表达的重组质粒;将重组质粒转化至感受态细胞中进行诱导表达.本发明中的抗体...
首先,使用cona(刀豆凝集素,可以结合细胞膜或核膜的糖蛋白)beads捕获消化后的单细胞,对细胞进行通透化处理,之后向体系中加入目的蛋白的特异性抗体,然后利用微球菌核酸酶(mnase)或者转座酶(tn5)与protein a(能够识别结合抗体的igg结构域)组成的融合蛋白,识别并捕获细胞内的抗体-靶蛋白复合物,使用ca 2+ /mg 2+ 激活...