酶切位点是为了形成粘性末端,易于插入空白质粒并保证方向性。而保护序列可以用来保护PCR产物并方便酶切。
不能随便截取。不考率二聚体可以,不考虑GC分布也可以,但是要考虑Tm值啊,Tm值不仅跟GC含量有关,还和引物长度有关,设计的一对引物要看Tm值是否相互接近,是否接近55℃。
人iASPP全长CDS的分段扩增,克隆及鉴定 目的最初报道的iASPP长度为351个氨基酸,但最近发现iASPP的全长应为828个氨基酸,为了探讨全长iASPP的功能,我们采取3分段扩增的策略克隆全长iASPP基因.方法从HL-60细胞... 陈杰,辛海明,蔡云,... - 《第三军医大学学报》 被引量: 0发表: 2007年 人iASPP全长CDS的发现、...
当然,对于非编码基因,比如lncRNA,通常不编码蛋白,也就没有CDS一说,这时候扩增全长即可。
有CDS序列,想得到全长,怎么设计引物?该怎么做 @biostar2009@youlinglyw@wizardfan@飞约疯人院发自...
然后做个RT-PCR好了。引物设计,NCBI的primer blast了解一下,扩增产物长度设定为全长就ok :cat59:...
有基因序列号,你就可以直接上genebank下载其序列,下载到全序列,你需要扩增的CDS区,也就是编码区,可以全外显子扩增,这样简单一点,也可以做cDNA克隆,然后再做,前者的话就可以直接根据其基因序列NG号设计引物,如果是做CDNA的话就根据其mRNA的序列NM号设计引物. 你是根据其cDNA设计的引物,你需要下提取mRNA...
你克隆模板是DNA还是mRNA?终止密码子肯定有问题。而且密码子有很多系列
常用的技术是RACE,根据已知的序列用随机引物扩增未知序列。 5 0 回复 0条评论 您可能感兴趣的主题 模具电极尺寸如何设计? 2017-09-02 模具电极尺寸如何设计?模具电极尺寸如何设计? 以成型目标10*10*10毫米型腔为例,电极要做两种尺寸, 机械设计时如何设计尺寸的精度 2017-10-13 20:13:07 机械设计时如何设计...
从ATG开始就行,一般都能扩出来。需要基因mRNA的全长,一般是CDS开头结尾GC含量太高扩不出来,或者CDS...