不能随便截取。不考率二聚体可以，不考虑GC分布也可以，但是要考虑Tm值啊，Tm值不仅跟GC含量有关，还和引物长度有关，设计的一对引物要看Tm值是否相互接近，是否接近55℃。
有基因序列号,你就可以直接上genebank下载其序列,下载到全序列,你需要扩增的CDS区,也就是编码区,可以全外显子扩增,这样简单一点,也可以做cDNA克隆,然后再做,前者的话就可以直接根据其基因序列NG号设计引物,如果是做CDNA的话就根据其mRNA的序列NM号设计引物. 你是根据其cDNA设计的引物,你需要下提取mRNA...
然后做个RT-PCR好了。引物设计，NCBI的primer blast了解一下，扩增产物长度设定为全长就ok :cat59:...
有CDS序列，想得到全长，怎么设计引物？该怎么做 @biostar2009@youlinglyw@wizardfan@飞约疯人院发自...
TAIL pcr 获得全长