CCK-8（Cell Counting Kit-8）是一种常用于细胞增殖和细胞毒性检测的试剂盒，它包含的WST-8试剂在细胞内线粒体的脱氢酶作用下被还原，生成水溶性的橙黄色甲臜产物，其数量与活细胞数量成正比。CCK-8检测法适用于悬浮细胞，因为生成的甲臜产物是水溶性的，不需要换液，对细胞的毒性小，且操作简便.实验步骤 细胞...
细胞准备：计数悬浮细胞，并根据实验需要调整细胞浓度。将细胞悬液加入到96孔板中，每孔体积约为100μL，通常每个样本设置3个重复孔。预培养：将含有细胞的96孔板放入37°C、5% CO2的培养箱中预培养，以促进细胞适应环境和贴壁（如果细胞为贴壁型）。对于悬浮细胞，这一步可以省略。加入CCK-8试剂：向每个孔中加入1...
接种细胞：在96孔板中加入细胞悬液，每孔约100μl，根据实验设计设置重复孔。预培养：将培养板放入培养箱中预培养一段时间，以使细胞适应环境。对于悬浮细胞，这一步可以省略，因为它们不需要贴壁生长。加入CCK-8试剂：每孔加入适量的CCK-8溶液（通常为10μl），轻轻晃动培养板以助于混合。孵育：将培养板放回培养...
🔢 第一步:细胞计数与悬液制备 首先,使用细胞计数仪计算细胞数量,并制备细胞悬液。将培养瓶中的细胞转移到ep管中,离心(900rpm,5min)后去除上清液。使用1ml培养基重悬细胞,取10微升进行计数。根据计数结果,制备所需浓度的细胞悬液。📊 第二步:细胞铺板与接种 在96孔板的最外围加入100微升PBS,以减少边缘挥发...
悬浮细胞CCK-8培养方法步骤 悬浮细胞使用CCK-8进行细胞增殖或毒性检测的步骤如下：准备细胞悬液：首先收集对数生长期的悬浮细胞，并调整细胞悬液的浓度。接种细胞：将细胞悬液加入96孔板中，每孔约100μl，以达到适当的细胞密度（通常为1000-10000个细胞/孔）。预培养：将含有细胞的96孔板放入37℃、5% CO2的培养箱...
(4)可能是加入的CCK-8试剂微量没有加准。为避免这种情况,可以直接配制含10% CCK-8的培养基,以换液的形式加入96孔板中,每孔100μl。 计算方法 细胞抑制率 =(对照-实验)/(对照-空白)×100% 对照:具有细胞、培养基、CCK-8的孔的OD值 实验:具有细胞、培养基...
对于悬浮细胞，在加入CCK- 8孵育1～4小时后，可先从培养箱中取出，目测染色程度或用酶标仪测定决定CCK- 8最佳孵育时间。若显色困难，可将培养板放回培养箱，继续培养数小时后再测定。对于贴壁细胞，CCK- 8的孵育时间一般为1～4小时，多数细胞培养30分钟左右即可肉眼观察到明显的显色反应，培养3.5～4小时左右...
其中，CCK-8（Cell Counting Kit-8）作为一种广泛应用于细胞增殖和毒性检测的试剂盒，因其操作简便、灵敏度高、对细胞毒性低等优点，成为了悬浮细胞实验中不可或缺的一部分。本文将深入探讨CCK-8实验在悬浮细胞培养中的应用，包括实验原理、步骤、注意事项以及数据分析，旨在为研究者们提供一份详尽的操作指南。###...
CCK8不需要用到板式离心机的。至于你说的怕实验效果不明显，CCK8相对与MTT已经是比较灵敏的方法了。建议...
MT T 法和C C K-8法检测悬浮细胞增殖的比较 侯春梅,李新颖,叶伟亮,曹曦元,肖 鹤,黎 燕 (军事医学科学院基础医学研究所,北京 100850) 在细胞学实验中,M T T 比色法和3H -T D R 掺入法常用于细胞毒性、细胞活性和细胞增殖的检测。因M T T 法具有简便、经济、安全等特点,而被广泛使用,但其操作...