细胞准备:计数悬浮细胞,并根据实验需要调整细胞浓度。将细胞悬液加入到96孔板中,每孔体积约为100μL,通常每个样本设置3个重复孔。预培养:将含有细胞的96孔板放入37°C、5% CO2的培养箱中预培养,以促进细胞适应环境和贴壁(如果细胞为贴壁型)。对于悬浮细胞,这一步可以省略。加入CCK-8试剂:向每个孔中加入1...
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(1)接种细胞数:针对标准96孔板,贴壁细胞的最小接种量为1000个/孔 (100μl培养基)。若为白细胞,接种量不低于2500个/孔 (100μl培养基)。若使用24孔板或6孔板,应预先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。 (2)在细胞毒性实验中...
对于悬浮细胞而言,由于细胞不贴壁,直接利用CCK-8进行检测时,需确保细胞均匀分散于培养基中,以便准确反映细胞增殖情况。### 二、实验材料与方法### 实验材料- CCK-8试剂盒- 悬浮细胞系(如白血病细胞、淋巴细胞等)- 细胞培养基- 96孔板或适宜的培养容器- 移液器及枪头- 酶标仪(或分光光度计)- 离心机-...
CCK8不需要用到板式离心机的。至于你说的怕实验效果不明显,CCK8相对与MTT已经是比较灵敏的方法了。建议...
对于悬浮细胞,在加入CCK-8孵育1~4小时后,可先从培养箱中取出,目测染色程度或用酶标仪测定决定CCK- 8最佳孵育时间。若显色困难,可将培养板放回培养箱,继续培养数小时后再测定。对于贴壁细胞,CCK- 8的孵育时间一般为1~4小时,多数细胞在培养30分钟左右即可肉眼观察到明显的显色反应,培养3.5~4小时左右...
不一样,悬浮细胞与贴壁细胞相比较难染色。对于贴壁细胞,一般加入CCK8 培养1-4 小时吸光度已经很高,但对于悬浮细胞则可能吸光度较低,可以通过延长CCK8 的加入时间或增加细胞数量来解决。如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击engreen.com.cn/cck-8-ki
CCK8法检测细胞增殖能力时,若是贴壁细胞只要将培养液取出测OD值即可,由于是悬浮细胞,细胞浮在培养液里...
悬浮细胞cck8测IC50真的好难把细胞铺匀啊! 前提:细胞是悬浮的,还葡萄串样成团生长; 目前方法:先尽量吹开成单细胞悬液,计数(好难记准!);96孔板每孔加入50微细胞悬液,再加入50微不同浓度的药物;24h后每孔加10微的cck8,孵育2-4h测OD值 现在遇到问题有:1、复孔之间差异比较大,悬浮细胞铺不匀;2、不能换...
MT T 法和C C K-8法检测悬浮细胞增殖的比较 侯春梅,李新颖,叶伟亮,曹曦元,肖 鹤,黎 燕 (军事医学科学院基础医学研究所,北京 100850) 在细胞学实验中,M T T 比色法和3H -T D R 掺入法常用于细胞毒性、细胞活性和细胞增殖的检测。因M T T 法具有简便、经济、安全等特点,而被广泛使用,但其操作...