这些带状图案中,尾部呈现延伸状,类似彗星,故得名彗星电泳。通过观察这些带状图案,可以评估DNA损伤与修复、细胞凋亡等生物学过程,是一项重要的生物分析技术。 实验步骤: 1、准备细胞:将细胞铺于六孔板中,待其生长到80%-90%的密度,收集细胞并进行计数,然后使用PBS缓冲液将其稀释至每毫升含有100个细胞。 2、玻片(载玻片)
彗星实验可以帮助我们更好地理解彗星的形成和性质。以下是彗星实验的步骤: 材料: -一块冰块 -一盆水 -一小束干冰 -一台射灯或强力手电筒 -一个黑暗的室内或夜晚的户外空间 步骤1:准备冰块和水 在一盆水中放入一块冰块,确保冰块完全浸泡在水中。这样可以模拟太阳系中的彗核。 步骤2:制作彗尾 将一小束干冰...
彗星实验实验步骤 彗星实验是一种用于检测单个细胞DNA损伤的常用技术,因其在显微镜下观察到的DNA迁移形态类似彗星拖尾而得名。该实验通过细胞裂解、电泳分离及荧光染色等步骤,评估DNA链断裂程度。以下为具体实验步骤,适用于生物医学研究领域,需在具备生物安全二级实验室条件下操作。 实验前准备需确保所有试剂配置完毕。
(2) 细胞裂解 移去盖玻片,将载玻片浸入新配置的细胞裂解液中至少裂解1h(在放第一片开始计时,再以同样的顺序取出,确保每张片子裂解时间相同)。此步骤的目的是溶解细胞膜及核膜,除去蛋白质、RNA等,仅存留核骨架。 (3) DNA碱解旋 细胞裂解后,取出载玻片,用PBS冲洗2次,以去掉载玻片表面高浓度的盐,然后将载玻片置...
彗星实验是一种常用的遗传毒性检测方法,以下是详细的实验步骤: 制备单细胞悬浮液:将单细胞悬浮液与低熔点琼脂糖(LM琼脂糖)混合,并在37℃条件下进行操作。 涂布混合物:将琼脂糖和细胞的混合物均匀地涂布在预处理的载玻片上。 裂解处理:在4℃条件下,用含有去垢剂和高盐溶液的裂解液处理30-60分钟或过夜,以去除多...
彗星实验第一步:分离制备单细胞悬液: (1)体外培养的细胞株:用胰酶消化,最后用PBS悬浮吹打成单细胞悬液,细胞要计数,具体的量我前边已经说过。 (2)体内脏器细胞:处死动物,取出脏器,于Hanks’液中制备成单个细胞悬液。 彗星实验第二步:胶板制备: (1)取100μl于45℃水浴中保温的0.5%NMA,铺于磨沙载玻片上,形...
彗星实验是一种用于测量DNA损伤的实验方法,其量化步骤如下: 1.细胞处理:将待测细胞进行处理,例如加入化学物质或辐射等,以诱导DNA损伤。 2.细胞裂解:将处理后的细胞进行裂解,使细胞内的DNA暴露出来。 3.电泳:将裂解后的细胞进行电泳分离,一般采用琼脂糖凝胶电泳,将DNA片段按大小分离。 4.染色:将电泳后的DNA染色...
水稻植株彗星实验步骤 通过将Singh和Gichner等人建立的碱性彗星实验方案应用于水稻(Oryza sativa L.)来确定原发性DNA损伤。所有的实验步骤都是在冰床上避光进行的。 1、对于每一盆水稻,取鲜叶0.1 g,用刀片切碎,加入2个100 μL装有三羟甲基氨基甲烷盐酸提取缓冲液(Tris-HCl提取液,0.1 M,pH=7.5,4℃保存)的离...
彗星实验详细步骤(二) 📌 细胞处理 将寄来的细胞加入PBS,冲洗一次后离心,调整细胞浓度至106～107个/ml,立即进行以下步骤。 📌 胶板制备 第一层胶:将80μl预热至56℃的0.5%正常熔点琼脂糖(溶于无Ca2+,Mg2+的磷酸缓冲液PBS)滴到预热的载玻片磨砂面,迅速盖上干净的盖玻片,4℃放置10分钟使其凝固。 第二层...