将玻片缓慢浸入新鲜配制的冰冷细胞裂解液中,保持在4℃条件下裂解2小时(或至少裂解1小时)。碱化处理及电泳:将玻片取出,置于水平电泳槽中(正极端),并排放置,确保无空隙。倒入新鲜配制的冰冷电泳缓冲应用液,使其高出胶面2毫米,避免气泡存在。放置一段时间(如10至30分钟,通常选用15分钟),以使DNA解链。...
(1)将制备好的胶板去掉盖玻片后,浸于4℃预冷的细胞裂解液中,在4℃下裂解2.5到3小时。 (2)取出胶板,用双蒸水浸没漂洗后放入电泳槽中,浸泡在4℃预冷的电泳液中解旋20分钟。 (3)玻片水平放置阳极端附近,4℃电泳20到25分钟(25V,300mA)。可在电泳槽周围加冰块以保持低温。 彗星实验第四步:中和与染色: (1...
6、碱化处理及电泳:将玻片取出,置于水平电泳槽中(正极端),并排放置,确保无空隙。倒入新鲜配制的冰冷电泳缓冲应用液,使其高出胶面2毫米,避免气泡存在。放置10至30分钟,通常选用15分钟,以使DNA解链。设定电压为25V,电流为300mA,进行20分钟的电泳。 7、中和:切断电源,取出玻片并置于染缸中,用中和缓冲液(Tris-HCl...
6、碱化处理及电泳:将玻片取出,置于水平电泳槽中(正极端),并排放置,确保无空隙。倒入新鲜配制的冰冷电泳缓冲应用液,使其高出胶面2毫米,避免气泡存在。放置10至30分钟,通常选用15分钟,以使DNA解链。设定电压为25V,电流为300mA,进行20分钟的电泳。 7、中和:切断电源,取出玻片并置于染缸中,用中和缓冲液(Tris-HCl...
彗星电泳实验基于凝胶电泳技术,通过在电场中将DNA或其他生物分子移动到凝胶中,利用分子大小和电荷差异产生的不同迁移速度分离这些分子。样品加载到凝胶中后,在电场作用下,带负电荷的分子会向阳极移动,而带正电荷的分子则向阴极移动,形成不同长度的带状图案。这些带状图案中,尾部呈现延伸状,类似彗星,故得名彗星电泳。通...