对于PCR反应来说GC含量在40%—60%,一般50%左右比较合适;而对于测序引物和杂交探针来说GC含量至少应为50%。产物中GC含量最好大于引物中的GC含量。 二、Degeneracy 多义性 当设计多义引物时应尽量减少引物多义性,这样会带来更好的特异性,应尽量避免3‘末端的多义性,因...
通过测定DNA的GC含量,可以预测DNA序列的稳定性,为研究DNA的双链断裂、DNA损伤修复等提供理论依据。 GC含量的测定和分析在生物学研究中具有重要意义。通过选择合适的测定方法,可以准确测定DNA中的GC含量,并揭示其在基因组分析、DNA序列设计、基因调控和DNA结构稳定性等方面的应用。随着技术的不断进步,GC含量的研究将为...
GC含量是基因组学和分子生物学领域中一个重要的参数,可以在一定程度上反映一个基因或一个生物体的特性和功能。本文将从GC含量的定义、测定方法、影响因素以及在生物学研究中的应用等方面进行阐述。 GC含量是指DNA或RNA序列中G和C的比例。在DNA分子中,G和C之间通过三个氢键相互连接,而腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)...
1. 引物跨内含子设计：选择跨内含子设计的引物，这样可以避免gDNA污染对实验结果的影响。这样产物来源于c...
引物GC含量：一般为40%~60%，两条引物的GC含量应尽量相似。GC含量过低会使引物不稳定，过高会导致非特异性扩增或难以解链。引物Tm值：即解链温度，与引物长度、GC含量和碱基组成有关。一般为50~65℃，两条引物的Tm值应尽量接近，差异最好在1℃以内，最多不超过5℃。引物3’端：是延伸开始的地方，因此要防止...
就这两个数来看其实可以用了.Tm在50-60,GC%在35-50其实都可以.重要的数据是,你的false priming的预测如何,就是预测的错配概率是多少.另外是否有茎环结构,引物二聚体概率多少,这些是关键数据.你用软件预测一下,都是可以算的.只要这些的概率不大,就没什么问题的.另外你的primer多长?如果不放心的话可以在增加...
避免引物二聚体：使用引物设计软件检查引物之间的互补性，避免引物二聚体的形成。降低GC含量：选择GC含量...
百度试题 结果1 题目在PCR反应中,引物设计的原则不包括以下哪项? A. 引物的序列应与模板DNA互补 B. 引物的GC含量应保持在40-60% C. 引物的Tm值应接近 D. 引物的5'端可以存在多个连续的G 相关知识点: 试题来源: 解析 D 反馈 收藏
GC含量高，说明解链温度高，目的条带在较高温度才会解链，而在未达到解链温度时，引物会以未完全解链的DNA为模板，进行PCR非特异性扩增，所以易出现非特异性条带。降低退火温度，DNA复性减缓，增加非特异性互补机会，使非特异性条带增多。
以验证该方法在非高GC含量(35.2%~53.5%)DNA序列PCR扩增中的实用性.结果采用本研究方法,所有15对高GC含量DNA序列均成功扩增;统计结果显示,Tm值和△Tm是影响高GC含量DNA序列扩增的主要因素.结论设计具有较高Tm值和较低△Tm的引物可有效的解决高GC含量DNA序列的PCR扩增问题.另外,在较高的退火温度下,引物或DNA序列...