百度试题 题目PCR反应的引物设计中合理的GC含量可以为 A.10%B.20%C.50%D.90%相关知识点: 试题来源: 解析 C 反馈 收藏
一、GC% GC含量 对于PCR反应来说GC含量在40%—60%,一般50%左右比较合适;而对于测序引物和杂交探针来说GC含量至少应为50%。产物中GC含量最好大于引物中的GC含量。 二、Degeneracy 多义性 当设计多义引物时应尽量减少引物多义性,这样会带来更好的特异性,应尽量避免3...
3)GC=30-80%. 4)3'端最后5个碱基内不能有多于2个的G或C. 5)正向引物与探针离得越近越好,但不能重叠。 6)PCR扩增产物长度: 引物的产物大小不要太大,一般在80-250bp之间都可;80～150 bp最为合适(可以延长至300 bp)。 7)引物的退火温度要高,一般要在60度以上; 要特别注意避免引物二聚体和非特异性...
引物设计的基本原则是什么? 引物长度一般在 15-30 碱基之间引物 GC 含量在 40%-60% 之间碱基要随机分布引物自身及引物之间不应存在互补序列引物 5′端和中间△ G 值应该相对较高,而 3′端△ G 值较低扩增产物的单 - 小金学姐于20240802发布在抖音,已经收获了8530个
4. 引物序列的GC含量一般为40-60%。过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大; 5. 引物所对应模板位置序列的Tm值在72℃左右可使复性条件最佳。Tm值的计算有多种方法,如按公式Tm=4(G+C)+2(A+T); 6. 引物5'端序列对PCR影响不太大,因此常用来引进修饰位点或标记物。可根据下一步实...
③Search parameters还是选Manual吧,Search stringency应选High,GC含量一般是40-60%。其它参数默认就可以了。 ④搜索出来的引物,按Rating排序,逐个送Oligo软件里评估。当然,搜索出的引物,其扩增产物很短,你可以不选择它,或是引物3端≥2个A或T,或引物内部连续的G或C太多,或引物3端≥2个G或C,这样的引物应作为次...
就这两个数来看其实可以用了。Tm在50-60，GC%在35-50其实都可以。重要的数据是，你的false priming的预测如何，就是预测的错配概率是多少。另外是否有茎环结构，引物二聚体概率多少，这些是关键数据。你用软件预测一下，都是可以算的。只要这些的概率不大，就没什么问题的。另外你的primer多长？如果...
PCR 反应的合适 Tm 范围为56-63 (50-70),GC% 含量:对于PCR 反应 10、来说 GC含量在50% 左右比较合适。 (40-60%,45-55%),Degeneracy多义性,尽量减少引物多义性,这样会带来更好的特异性,尽量避免3末端的多义性,因为这个位置即使一个碱基的错配都能阻止引物延伸。,BLAST 验证引物,进入http: //BLAST/, ...
有的模板本身条件比较困难,例如GC 含量偏高或偏低,导致找不到各种指标都十分合适的引物;用作克隆目的的 PCR,因为产物序列相对固定,引物设计的选择自由度较低。在这种情况只能退而求其次,尽量去满足条件。 做RealTime 时,用于SYBRGreenI 法时的一对引物与一般PCR 的引物,在引物设计上所要求的参数是不同的。引物...