百度试题 结果1 题目在PCR反应中,引物二聚体的形成通常是由于什么原因? A. 引物浓度过高 B. 引物长度过短 C. 引物Tm值差异过大 D. 所有以上因素 相关知识点: 试题来源: 解析 D 反馈 收藏
而最根本的原因是由引物之间或者引物自身 3'端部分碱基互补结合造成的。当引物对之间的部分序列存在同源性时,可形成引物二聚体。如果在 PCR 反应过程中引物退火形成二聚体,则 TaqDNA 聚合酶可延伸二聚体,形成长于原始引物的产物,它可导致循环过程中更易出现退火错误。根据长度的不同,引物也可能出现自身折叠,由此...
引物浓度：当引物浓度过高时，引物分子之间的碰撞几率增加，容易形成二聚体。退火温度：退火温度过低，使得...
引物二聚体通常是引物设计问题，需要重新设计引物。也有可能是 引物放太久了发生了部分降解导致更容易形成...
如果没有杂带，只是目的条带不亮，就不是特异性问题，而是扩增效率较低。可能是引物结合不好，或者两个引物退火温度差异过大等原因。可以先试一试降低退火温度，增加循环数。提高模板浓度，或回收后再次扩增也可以试一试。如果要求不是很高，这样优化一下就差不多了。
只要你扩增体系内添加了引物，要么会有扩增产物，要么会有二聚体，或者二者都存在，至于你说的这种情况，要么是引物降解了，要么是电泳时间长，二聚体都已经跑过了，因为引物二聚体一般分子量较小，很容易就跑出去的
求助：PCR反应之后只有引物二聚体，这是什么原因？是退火温度不够吗？
请问这是什么原因呢? 相关知识点: 试题来源: 解析 NCBI上的序列也不是全部都包括在内,这种情况很正常. 要想保险的话,你就两个条带都回收测序. 还有可能,是电泳液不干净,混有别的片段. 分析总结。 引物在ncbi上电子扩增显示是特异的扩增出来却是三条带目标带很明显16k下方有一条03k的带和二聚体...
第二条有条带的,引物二聚体也很多。貌似第五条也是引物二聚体吧, 不知道你的目的条带的分子量是多少? 黎明前的明 引物太大了还是你没做的梯度,温度设置不好 zishilanxuan 3楼: Originally posted by 黎明前的明 at 2012-06-20 22:17:23 引物太大了还是你没做的梯度,温度设置不好 引物不大啊,一个...
如果没有杂带，只是目的条带不亮，就不是特异性问题，而是扩增效率较低。可能是引物结合不好，或者两个引物退火温度差异过大等原因。可以先试一试降低退火