百度试题 结果1 题目在PCR反应中,引物二聚体的形成通常是由于什么原因? A. 引物浓度过高 B. 引物长度过短 C. 引物Tm值差异过大 D. 所有以上因素 相关知识点: 试题来源: 解析 D 反馈 收藏
引物二聚体是在PCR反应的退火步骤中形成的,主要原因如下:引物自身互补:如果引物的序列存在互补区域,它...
引物二聚体形成的原因 1. PCR循环次数过高 2. PCR退火温度低 3. 模板量过低 4. 引物浓度过大 5. 引物长度过短 引物二聚体的形成是在实时荧光定量PCR设计和验证过程中最常见的问题之一。而最根本的原因是由引物之间或者引物自身 3'端部分碱基互补结合造成的。当引物对之间的部分序列存在同源性时,可形成引物二...
引物二聚体通常是引物设计问题,需要重新设计引物。也有可能是 引物放太久了发生了部分降解导致更容易形成...
如果没有杂带,只是目的条带不亮,就不是特异性问题,而是扩增效率较低。可能是引物结合不好,或者两个引物退火温度差异过大等原因。可以先试一试降低退火温度,增加循环数。提高模板浓度,或回收后再次扩增也可以试一试。如果要求不是很高,这样优化一下就差不多了。
我觉得最大可能是模板太少而引物太多。以下方法试试:1.检查引物序列,特别是3'端是否有互补区;2....
引物太大了还是你没做的梯度,温度设置不好 zishilanxuan 3楼: Originally posted by 黎明前的明 at 2012-06-20 22:17:23 引物太大了还是你没做的梯度,温度设置不好 引物不大啊,一个16 一个18的,温度可能没做好吧, 孙启亮 也有可能你的产物浓度太低,而你的PCR产物没混匀,导致你点样的时候恰巧没点出...
如果没有杂带,只是目的条带不亮,就不是特异性问题,而是扩增效率较低。可能是引物结合不好,或者两个引物退火温度差异过大等原因。可以先试一试降低退火
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