📖 具体步骤如下: 构建酵母展示库:将白色念珠菌(Candida albicans)的蛋白质基因导入酿酒酵母中,使其蛋白展示在酵母表面。 筛选与PD-L1结合的蛋白:使用PD-L1-Fc融合蛋白作为探针,混合展示真菌蛋白的酵母细胞。通过磁性细胞分选(MACS)富集与PD-L1结合的酵母细胞,再用流式细胞术(FACS)进一步筛选出结合最强的酵母。
作者通过反相蛋白质阵列(RPPA)技术,同时定量检测几百种蛋白,发现肿瘤相关巨噬细胞(TAM)来源外泌体中,PD-L1表达量显著提高(见下图A),通过纳米金免疫电镜技术,证明PD-L1存在于外泌体表面(见下图B),通过WB实验发现,PD-L1在外泌体中富集,同时也具备外泌体标志物CD63、TSG101和CD9(见下图C),通过碘克沙醇密度...
结果发现PD-L1通路阻断后免疫抑制标记物MERTK、MARCO和PDGF-akt的表达显著降低,TNF-α表达增高,而抗PD-L1治疗并未影响白介素1mRNA的表达。 最后,研究评估了接受抗PD-L1治疗的小鼠肝巨噬细胞捕获耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的能力。发现与同类型抗体相比,抗PD-L1治疗可使慢性肝损伤小鼠的巨噬细胞吞噬能力持...
PD-L1+TAMs在人肿瘤中的生物学意义和功能作用尚不清楚。 基于小鼠肿瘤模型的机制研究表明,表达PD-L1的TAMs在抑制抗肿瘤免疫中发挥重要作用。然而,临床研究表明,在未经免疫治疗的肺癌、肝癌、乳腺癌(BC)患者中,表达PD-L1的TAMs与更好的总生存率相关。此外,在膀胱癌、尿路上皮癌或BC患者中,骨髓细胞表达PD-L1比癌...
程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)是免疫检查点,在激活的T细胞中表达上升,能够诱导免疫耐受。在肿瘤细胞表面常高表达其配体PD-L1,通过与PD-1结合使肿瘤细胞逃脱机体的免疫杀伤。 在肿瘤微环境中,PD-1不仅能抑制T细胞的免疫功能,还能抑制B细胞、NK细胞和DC细胞的功能。近年研究发现,巨噬细胞在病原刺激下也有PD-1的表达,...
一、PD-L1在血管损伤后调节巨噬细胞极化 1.1 PD-L1的表达与分泌 PD-L1是一种膜蛋白,在巨噬细胞活化时表达量会增加。此外,炎症细胞和损伤组织还能分泌PD-L1,通过与周围的受体相互作用来调节免疫反应。在血管损伤后,损伤组织中的巨噬细胞和其他炎症细胞会大量分泌PD-L1,供附近的细胞利用。 1.2 PD-L1与巨噬细胞...
本研究对HCC中PD-L1的异常模式进行了系统分析,以评估PD-L1表达、免疫抑制TME(尤其是TAMs)、巨噬细胞源性细胞因子和炎症反应活性之间的关系。在CTRP和PRISM数据库中对PMIHigh患者的免疫抑制和慢性炎症微环境特异性筛选并初步验证了四种候选药物(包括达沙替尼、vemurafenib、topotecan和AZD6482),并具有较高的可信度。这...
大约10年前，研究人员发现肿瘤细胞会利用基于PD-1/ PD-L1的免疫保护措施来为自己牟利。肿瘤细胞会表达PD-L1蛋白，通过PD-L1蛋白的受体结合来抑制T细胞的侵袭。目前，癌症患者正在使用阻断PD-1受体或阻断其结合配体PD-L1的抗体药物来进行治疗，以关闭T细胞功能抑制的相关细胞信号。“抗PD-1或PD-L1药物的应用是癌症...
用抗PDL1抗体阻断PD‐L1可导致巨噬细胞表型向免疫抑制作用减弱的方向转变,恢复肝巨噬细胞的体内吞噬活性,并减少细菌传播。 因此,肝硬化的特征是与免疫抑制转录组特征相关的巨噬细胞吞噬功能明显受损。PD-1 / PD-L1轴在肝巨噬细胞活性受损中起主要作用。PD-L1阻滞剂可逆转免疫抑制特性并增强肝硬化中肝巨噬细胞的...
针对PD-1和PD-L1蛋白的抗体已被证明通过释放人体T细胞来抵抗癌症。最近,斯坦福大学医学院科学家研究表明,这种治疗方式也可以以一种完全不同的方式抗击抗癌,那就是通过促使巨噬细胞吞噬癌细胞。 该研究对应的论文发表于最新上线的Nature杂志,题为“PD-1 expression by tumour-associated macrophages inhibits phagocytosis...