Day7-10:再次使用CD3/CD28激活剂刺激CD8+T细胞,并保持细胞浓度在1-1.5*10e6左右。 Day14:肿瘤细胞消化后终止洗涤,以5×105 cells/ml的浓度重悬于培养基中,并以1ml/孔接种于24孔培养板中,培养箱孵育过夜。 Day15:收集CD8+T细胞,计数细胞。对于所有共培养孔,上层放入小室(贴壁细胞可不加),将CD8+T细胞按1 :...
文中报道了一种白癜风小鼠模型的建立方法，即在C57 BL/6背景小鼠中接种B16F10黑色素瘤细胞，接种的同时杀除Treg细胞，因黑色素瘤细胞和黑色素细胞存在共享抗原，这一操作激活了小鼠内源性的自体识别性CD8+杀伤性T细胞，从而杀伤表皮黑色素细胞，导致白癜风的发生。同时，文章介绍了如何使用流式细胞术及wholemount染色方...
这些簇很可能代表了衰竭的CD8+ T细胞。耗竭CD8 + T细胞出现于干扰素信号激活后的肿瘤微环境中 最近的研究表明，在长期I型干扰素（IFN-I）刺激下，晚期癌症的肿瘤组织中T细胞衰竭水平显著上调。相比之下，缺乏IFN-I刺激的T细胞表现出较低的衰竭水平，并增加了对肿瘤细胞的抑制能力。因此，作者进一步研究了在不同类型的...
在提取和激活CD8+T细胞的过程中，首先需要从血液中分离出PBMC（外周血单个核细胞）。具体步骤包括：在抗凝管中采集正常人或患者的外周血8-10ml，进行1000g、4℃的离心操作，以分离血清并收集下层用于提取PBMC。将下层悬液移至新管并加入等体积的PBS混匀，然后加入一半稀释后的Ficoll分离液。轻柔放置并进...
小鼠常规TCRαβ CD8+ T 细胞可以通过根据Time、FSC/SSC、排除粘连和死细胞、对 CD3ε+ 或 TCR-β+细胞进行设门,最后对 CD4-CD8α+ 细胞进行分析。 对CD3ε+ 或 TCR-β+ T 细胞进行设门是为了排除表达CD8α 的髓系细胞或 NK 细胞。但值得注意的是,这种设门策略仍然...
NLDC-145单克隆抗体与CD205(也称为DEC-205)反应。CD205是一种c型凝集素受体,在未成熟树突状细胞和不同上皮细胞类型上高度表达。已经广泛证明,通过特异性抗体-抗原复合物将抗原靶向DEC-205,可以有效地摄取和呈递MHC I和MHC II复合物上的抗原,从而分别激活抗原特异性CD8+和CD4+T细胞。
Th2型细胞因子(IL-4,IL-5,IL-13)的水平有所升高.在迟发型哮喘反应中,Th2细胞通过IL-4,IL-5,IL-13等激活嗜酸性粒细胞,淋巴细胞,单核细胞及中性粒细胞等,促进气道炎症反应,哮喘发病涉及大约50多种炎症介质和25种以上细胞因子,构成了炎性细胞相互作用的复杂网络.其特点是T细胞调控,非IgE依赖,与T细胞免疫应答...
研究者描述了靶向pd -1表达CD8+ Trm细胞的嵌合抗原受体的发展。pd -1靶向CAR-T细胞治疗DKO小鼠选择性地耗尽肝脏CD8+ Trm细胞并减轻自身免疫性胆管炎。本研究的工作强调了CD8+ Trm细胞的致病作用和pd -1靶向CAR-T细胞的潜在治疗用途。 DKO小鼠肝脏组织驻留记忆CD8+ T细胞的积累 ...
目的:明确小鼠肺癌树突状细胞(dendritic cells,DCs)中β-catenin的表达及其对CD8+T细胞激活的影响. 方法:建立小鼠(C57BL/6)肺癌模型,并分离培养肺癌及正常小鼠原代树突状细胞.用小鼠肺癌细胞培养液处理正常小鼠树突状细胞.采用流式细胞术分析肺癌小鼠树突状细胞及肺癌细胞培养液处理后的小鼠树突状细胞中β-catenin的表达...
1. CD8 T 细胞在启动期间的早期激活、增殖和效应分化在很大程度上不依赖于PD-1信号 PD-1在抗原特异性CD8 T细胞的TCR刺激后早期上调,并在慢性感染期间持续性保持较高表达水平,但在急性感染期间的CD8 T 细胞反应的效应峰值时显著下调(7, 56)。PD-1抑制作用的丧失与大多数病毒感染中效应CD8 T细胞扩增高峰时效应反...