总RNA细胞是节录自使用rneasy加小杰(qiagen)按照制造商insturctions。 RNA转变为因子使用retroscript®工具包(ambion)。 定量RT-PCR是使用taqman进行调查和用于ABI PRISM(R)7900HT实时PCR系统(应用生物系统公司)。 量化是使用一个人类脑因子标准曲线和正常化,18S rrna。 教统局局长提出数据的评议局的作为意味着四...
RT—PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平、细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT及基因特异性引物中的一种...