实时荧光RT-PCR可用于新型冠状病毒的核酸检测,RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA聚合酶链式扩增反应相结合的技术,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测...
新冠病毒核酸检测时常用实时荧光RT一PCR技术。TaqMan探针为一小段可与目标序列互补的脱氧核苷酸单链,且5′端含一个荧光基团R,3′端含一个淬灭基团QPCR复性的过程中,TaqMan探针和目标序列结合,新链延伸时,在DNA聚合酶的作用下,荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。下列叙述错误的是( ) A. RNA不能作为PCR的模板,需...
新冠病毒核酸检测是目前筛查新冠感染者最精准、有效、低成本的技术方式。核酸检测主要用荧光定量RT-PCR技术,这种技术是RT-PCR技术与荧光定量PCR技术的结合。实时荧光定量PCR(QuantitativeReal-timePCR)是通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为...
检测原理如图所示,探针是含荧光基团并有特定序列的DNA单链。下列说法错误的是( )A.逆转录和杂交DNA扩增所需的原料相同B.逆转录、扩增和分子杂交中碱基配对情况相同C.病毒RNA的遗传信息通过逆转录传递给单链DNAD.逆转录和杂交DNA扩增所需酶种类不同 3【题目】实时荧光RT—PCR技术可快速检测新冠病毒的核酸,为疫情...
实时荧光RT-PCR技术是将逆转录(RT)、PCR以及荧光标记等相结合的技术,是检测新型冠状病毒核酸序列最常用的方法。其具体的过程为:从样品中提取RNA→cDNA→PCR扩增→荧光检测。回答下列问题:(1)RT-PCR操作过程中,所需的酶有___。PCR过程中温度的控制至关重要,需要依次设置不同的循环温度参数:95℃-30s、55℃-45...
1 下图为采用“实时荧光定量RT-PCR”技术检测新型冠状病毒核酸的基本流程,1~2h内即可得到检测结果。其基本原理是在DNA的复制过程中加入与特定模板链互补的荧光探针,这样每新合成一条DNA单链,就会产生一个荧光分子,通过检测荧光信号即可确定是否为阳性。下列相关说法正确的是( )A.①、②过程需要分别加入四种核糖核苷酸...
面对新冠疫情,最常见的检测方法是新冠病毒核酸检测,原理为实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测法,技术流程如下图所示,①②③表示相关步骤。请回答:(1)PCR技术与DNA
RTPCR(逆转录聚合酶链式反应)法是目前核酸检测的主要方法,技术操作流程如下,回答下列问题。(1)①过程需要 酶,③过程中对两种引物的要求是 (回答1点即可)。 (2)核酸检测通常选取新冠病毒cDNA中的ORF1ab基因的原因是 。若加入的荧光基因探针序列为:5'-TTGCT……AGATT-3',如果样本中存在该基因序列,与探针结合...
23.(13分)新型冠状病毒的检测主要包含核酸检测、抗体检测、抗原检测等几种方法。其中利用实时荧光RT-PCR技术检测新型冠状病毒特异性核酸序列是最常用的方法。RT-PCR是将逆转录(RT)、PCR以及荧光标记等相结合的技术。下图1为数字PCR技术的原理示意图。荧光的出现是荧光探针水解导致的,荧光探针将首先与模板DNA的相应区...