实时荧光定量RT-PCR技术需要在常规PCR基础上添加荧光染料或荧光探针,荧光染料能特异性掺入DNA双链中,从而发出荧光信号。在新冠病毒肺炎疫情期间,可以通过实时荧光定量RT-PCR技术进行核酸检测。下列相关叙述正确的是( ) A. 图中的探针可能是利用荧光分子标记的新冠病毒独特的基因序列 B. 核酸检测是通过检测荧光信号来确...
RT-QPCR 是 Q-PCR 的一种,应用广泛,包括: 扩增特异性分析 基因定量分析 基因分型 SNP 分析 常用方法: SYBR Green I 非特异性方法 Taqman 水解探针特异性方法 二、SYBR Green I 非特异性方法 SYBR Green I 染料 与双链 DNA 结合,荧光信号强度与双链 DNA数量相关。 实验前准备 试剂与耗材: 特异性 PCR 引...
所需仪器与耗材有: LightCycler® 480 全自动实时定量 PCR 仪以及配 套使用的 96 或 384 多孔板,透明封板膜等一次性耗材。朗基T30 PCR 仪、rainin单道移液器、Nunc 冰盒及NEST 盒装吸头等。 实验操作流程: 1.用新鲜提取的 RNA 反转 录合成 cDNA 第一链,然后进行实时荧光定量 PCR,其中包括:SYBR Green 反...
“实时荧光定量RT-PCR”是新冠疫情防控的一把利刃,通常在l～2h内即可得到检测结果。TaqMan探针是实时荧光定量RT-PCR技术中一种常用探针(如图1),其5末端连接荧光基团(R),3末端连接淬灭剂(Q)。当探针完整时,R发出的荧光信号被Q吸收而不发荧光。在PCR扩增过程中,当Taq酶遇到探针时会使探针水解而释放出游离的R和...
如图为采用“实时荧光定量RT-PCR”技术检测新型冠状病毒核酸的基本流程,1～2h内即可得到检测结果。其基本原理是在DNA的复制过程中加入与特定模板链互补的荧光探针,这样
新冠病毒核酸检测是目前筛查新冠感染者最精准、有效、低成本的技术方式。核酸检测主要用荧光定量RT-PCR技术,这种技术是RT-PCR技术与荧光定量PCR技术的结合。实时荧光定量PCR(QuantitativeReal-timePCR)是通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为...
实时荧光定量 PCR (RT-qPCR) 是一种用于实时扩增和检测特定 DNA 或RNA 序列的分子生物学技术。该方法利用荧光染料或探针,当与扩增的 DNA 或RNA 分子结合时会发出信号,从而可以对目标序列进行量化。RT-qPCR 通常用于基因表达分析、病毒载量定量和基因突变检测等应用。 RT-qPCR原理的三个主要步骤: 1、反转录: 1...
“实时荧光定量qPCR”是新冠疫情防控的一把利刃,通常在1～2 h内即可得到检测结果。TaqMan探针是实时荧光定量RT—PCR技术中一种常用探针(如图1),其5′端连接荧光基团(R),3′端连接淬灭剂(Q)。当探针完整时,R发出的荧光信号被Q吸收而不发荧光。在PCR扩增过程中,当Taq DNA聚合酶遇到探针时会使探针水解而释放出...
下图为采用“实时荧光定量RT-PCR(即将病毒RNA逆转录后再进行PCR扩增)”技术检测2019nCoV核酸的基本流程,1～2h内即可得到检测结果。有关说法正确的是( ) A. 过程①是逆转录过程,不属于中心法则的内容 B. 过程②表示扩增DNA片段,需使用RNA聚合酶 C. 荧光标记法还可以用于探究DNA的复制方式 D. RT-PCR反应体系中...