在利用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测转基因成分的含量时,数据分析的规范化与标准化对保证实验数据的准确性及实验室间数据的可比性具有重要意义.本研究以转基因玉米(Zea mays)NK603为研究材料,分析了分别以qRT-PCR中3次平行反应的单个Ct值和3次平行反应Ct值的平均值所绘制标准曲线的差异...
本研究以转基因玉米(Zea mays)NK603为研究材料,分析了分别以qRT-PCR 中3次平行反应的单个Ct值和3次平行反应Ct值的平均值所绘制标准曲线的差异;分析了分别以盲样3次平行反应的Ct平均值和3次平行反应的拷贝数平均值(算术平均值或几何平均值)计算转基因成分含量的差异;并研究了结果准确性判定的方法。结果表明,标准...
转基因qrtpcr荧光定量实时 基金项目:国家自然科学基金资助项目(No.31401607)、转基因生物新品种培育重大专项(No.2013ZX08012-005)和环保公益性行业专项(No.201109028)收稿日期:2014-05-15接受日期:2014-09-09实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测转基因成分的数据分析及其标准化研究张丽1,2曹应龙2王海英1梁晓声1卢长明2*...
在利用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测转基因成分的含量时,数据分析的规范化与标准化对保证实验数据的准确性及实验室间数据的可比性具有重要意义.本研究以转基因玉米(Zea mays)NK603为研究材料,分析了分别以qRT-PCR中3次平行反应的单个Ct值和3次平行反应Ct值的平均值所绘制标准曲线的差异...
在利用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,q RT-PCR)检测转基因成分的含量时,数据分析的规范化与标准化对保证实验数据的准确性及实验室间数据的可比性具有重要意义。本研究以转基因玉米(Zea mays)NK603为研究材料,分析了分别以q RT-PCR中3次平行反应的单个Ct值和3次平行反应Ct值的平均值所绘制标准曲线...
因此,与普通的制备型PCR不同,实时荧光定量PCR允许在几个循环后自动确定多个PCR反应的成功,无需对每个反应进行单独分析,避免了“假阴性”的问题。五、qPCR的应用 qPRC可应用于基因表达分析(癌症研究、药物研究)、疾病诊断和管理(病毒定量)食品检测(转基因食品)和动植物育种(基因拷贝数)等多个方面,可以说...
实时荧光定量PCR技术 在转基因食品检测领域中的应用光信号开始由本底进入指数增长阶段的拐点所对应的循环次数,也就是每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。研究表明,每个模板的Ct值与该模板起始拷贝数的对数存在线性关系, 起始拷贝数越多,Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准样品可作出标准...
1ICS65.00.0CCSB05DB1辽宁省地方标准DB1/TXXXX—xxxx转基因玉米实时荧光定量PCR检测操作技术规程Technicalspecificationforreal-timePCRdetectionoftransgeniccorn(征求意见稿)xxxx-x-x发布xxxx-x-x实施辽宁省市场监督管理局发布
实时荧光定量PCR技术在转基因食品检测中的应用研究进展
结合PCR和探针杂交技术的实时荧光定量PCR技术,通过探测PCR过程中荧光信号变化,准确定量DNA模板量,其检测灵敏度比常规PCR技术高100倍左右,可检测到每克样品中含2 pg转基因DNA。在进行转基因成分定量分析时,依据所检测的外源目标序列不同,转基因食品实时荧光定量PCR检测水平可分为4种:通用序列检测、基因特异性序列检测...