对于qRT-PCR称呼有不同的形式,但总体上来说,实时定量反转录聚合酶链式反应(Real-Time Quantitative Reverse Transcription PCR)可能精细一些,毕竟qPCR仪器在采集数据的时候就是一种实时荧光数据收集,当然并不否认定量逆转录聚合酶链反应的称呼是错误的。 1.1 cDNA cDNA是一种由mRNA逆转录而来的DNA(有单/双链两种情况)...
方法:用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测49例结肠癌、49例配对的癌旁组织(距癌2cm)和49例配对远离结肠癌的手术切缘正常组织(距癌5cm以上)的Syndecan-1和HPA-1基因的表达水平,分析二者与结肠癌临床病理特征的关系。结果:结肠癌中HPA-1mRNA的表达水平(40.56±11.75)显著高于癌旁组织(18.28±11.33)...
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实时荧光定量逆转录一聚合酶链反应(RT 姜红涛姚秀林 抚顺市疾病预防控制中心,辽宁抚顺113006 [摘要]目的比较实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法 与细胞培养法检测流行性感冒病毒的差异。方法采用实时荧光定量 RT-PCR及经典的狗肾传代细胞病毒分离2种方法,同时对流感监测 点送检的80份疑似流感标本检测流感病毒...
实时荧光定量逆转录一聚合酶链反应 (RT 姜红涛姚秀林抚顺市疾病预防控制中心，辽宁抚顺113006目的比较实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法与细胞培养法检测流行性感冒病毒的差异。方法采用实时荧光定...
建立实时定量逆转录聚合酶链反应(RQ一PCR) 检测慢性粒细胞白血病 (CML)bcr/abl融合基因的方法,为CML临床诊断及微小残留病(MRD) 监测提 供重要诊断依据。 方法 采用传统的逆转录聚合酶链反应(RT一PCR) 扩增K562细胞管家基因 GUS及融合基因bcr/abl,以梯度稀释的扩增产物为标准品构建标准曲线,建立 ...
(三)RNA 逆转录为 cDNA 1.去除基因组 DNA 反应 (1)在 RNase-free 离心管中按照下表配制 10mμL 体系(以 Takara 试剂盒 Prime Script™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time),SYBR Green Ⅰ法为例)。 试剂 使用量 5×gDNA Eraser Buffer Buffer 2.0 μl gDNA Eraser Total RNA 2μ...
图1和图2所示新冠检测基本原理是:将新冠病毒RNA逆转录为DNA,采用多重荧光RT-PCR技术,因此荧光PCR法所用的试剂盒中通常都应该含有:逆转录酶、热稳定性DNA聚合酶(Taq酶)、TaqMan探针、引物、dNTP、Mg2+、缓冲剂系等。(2)由图2可知,引物、TaqMan探针能与模板链结合,因此,探针是依据新冠病毒RNA内部的一段序列(...
细胞病毒分离的阳性数为10份,RT-PCR与实时荧光定量RT-PCR的阳性数分别为12份和15份。实时荧光定量RT-PCR的灵敏度达0.01TCID50,且对甲1型流感病毒,乙型流感病毒,禽流感病毒H5,严重急性呼吸道综合征冠状病毒及其它呼吸道病毒均无交叉...
定量逆转录聚合酶链反应 定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)是一种常用的分子生物学技术,用于检测RNA的表达水平。该技术包括两个步骤:逆转录反应和聚合酶链反应。首先,通过逆转录酶将RNA转录成cDNA(反转录过程),然后使用DNA聚合酶扩增cDNA。通过纳米量热法分析PCR反应几率,可以定量分析样品中RNA的表达水平。 qRT-PCR...