解析 【解析】采用CTAB法提取拟南芥基因组,突变体T-DNA插人采用PCR法和Southem法检测,用TAILPCR扩增参试突变体T-DNA插入位点的侧翼序列,用DNAstmr软件分析取得的测序资料,分析T-DNA边界剪切位点,通过与拟南芥基因组数据库进行比对,即可确定T-DNA的插入位点。
解析 答:确定拟南芥基因组T-DNA插入位点的试验操作如下: (1)提取拟南芥基因组; (2)PCR法和Southern法检测突变体T-DNA插入; (3)采用Tail-PCR方法扩增突变体T-DNA插入位点的侧翼序列; (4)DNAstar软件分析,得到相应的测序结果,分析T-DNA边界剪切位点,与拟南芥基因组数据库比对,确定T-DNA的插入位点。
百度试题 题目7.如何确定拟南芥基因组T-DNA插入的位点?相关知识点: 试题来源: 解析
T-DNA可能随即插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。... 从BC开始5开始扩增的才是基因,如果是AD开始,扩增的是TDNA序列,这点要搞清楚 (2011?北京)T-DNA可随机插入植物基因组内,导致被插入基因发... (6)T-DNA存在于诱导形成的拟南芥突变体植株的DNA中.DNA连接酶可将不同的DNA片... DNA扩增过程所选的...
用t-dna特异性引物和基因组特异性引物进行PCR扩增后测序即可确定。
可以做Tail-PCR;直接基因组重测序,拟南芥比较容易也不是很贵,而且如果是多插入一般不会漏掉插入位点;如果是从tair上购买的突变体,tair上是有相关信息的,也有相关网站可以设计引物确定纯杂合 大概想到这几种方法,欢迎交流。
解析 采用CTAB法提取拟南芥基因组,突变体 T-DNA插入采用 PCR 法和 Southem法检测,用TAIL-PCR 扩增参试突变体 T-DNA 插入位点的侧翼序列,用 DNAstar 软件分析取得的测序资料,分析T-DNA边界剪切位点,通过与拟南芥基因组数据库进行比对,即可确定T-DNA的插入位点。