NAD+含量在最优条件下实验验证值可达 43.16 μmol/g DCW ,与优化前相比提高 了 123.6%,与初始菌株相比提高了 1029.8%。【结论】在大肠杆菌中共表达关键酶基因pncB 和 nadE , + + 胞内 NAD 合成量明显增加,前体物以及诱导条件的外源调节使 NAD 积累量达到最佳优化值。实现了 提高 NAD+含量的目标,胞内辅...
(1)过程①中,应提取海栖热袍菌的基因组DNA作模板;同时根据LDH(或目的)基因的核苷酸序列合成引物.(2)进行过程③前,利用Ca2+(或CaCl2)处理大肠杆菌,使其成为感受态细胞.(3)过程④中,应将大肠杆菌置于42℃条件下诱导培养;然后提取大肠杆菌的蛋白质进行检测,以鉴定目的基因是否成功表达. ...
诱导时长控制在24 h.NAD+含量在最优条件下实验验证值可达43.16 μtmol/g DCW,与优化前相比提高了123.6%,与初始菌株相比提高了1029.8%.[结论]在大肠杆菌中共表达关键酶基因pncB和nadE,胞内NAD+合成量明显增加,前体物以及诱导条件的外源调节使NAD+积累量达到最佳优化值.实现了提高NAD+含量的目标,胞内辅因子浓度...