“顺反子”(Cistron)可以算是“基因”的旧称,起源于比较古老的遗传学实验,这里不展开叙述。单顺反子,意思就是这段DNA中,含有编码单一蛋白的基因。而多顺反子(Polycistron或Multicistron),顾名思义,就是这段DNA中含有编码多个蛋白的基因。多顺反子常常存在于原核生物中,一个转录本,可以翻译出多个蛋白。而真...
为真核生物设计高效且广泛适用的多顺反子表达系统,可降低基因构建的复杂性,简化多步菌株工程,并且有助于生物合成途径中的酶在所需发酵条件下以预定的水平同步表达。 中国农业科学院生物技术研究所微生物智能设计与合成创新团队联合芬兰Vtt技术...
与表达来自唯一启动子的筛选标记的载体不同,多顺反子质粒确保任何筛选标记的阳性细胞也表达你的目的基因,因为它们都来自同一个转录本。 当然,多顺反子载体不必仅仅作为一种检测手段;它们几乎在任何期望在同一细胞中表达多个基因的时候都是有用的。虽然可以通过使用带有多个单独表达元件的质粒来驱动共表达,但是从同一个...
在真核生物中,大多数mRNA是单顺反子(monocistronic),即每个mRNA分子只编码一个蛋白质。然而,在某些情况下,一个mRNA分子可以编码多个蛋白质,这种现象被称为多顺反子表达。 多顺反子表达在某些生物学过程中具有重要作用,例如: 1. 病毒:许多病毒的基因组编码多顺反子mRNA。例如,逆转录病毒(如HIV)和某些正链RNA...
今天我们以EGFRvIII基因、P2A多顺反子元件、iRFP720基因插入到pLVX-TetOne载体中为例,介绍如何利用传统酶切酶连技术和同源重组技术进行构建多顺反子表达载体。 粘性末端克隆 使用传统酶切酶连法进行克隆时,首先需要分析酶切位点,经分析发现只有AgeI和BstZ17I两个酶切位点可用于EGFRvIII基因克隆,因为另外两个酶切位...
中国农业科学院生物技术研究所微生物智能设计与合成创新团队联合国内外研究机构开发出一种在真菌中实现多顺反子表达的系统,提升了真核细胞工厂合成工农业高价值化学品的原创设计能力。近日,相关研究成果发表在《自然通讯(Nature Communications)》上。 合成生物学能够重新编程细胞,构建细胞工厂,高效生产临床和农用药物、工业...
中国农业科学院生物技术研究所微生物智能设计与合成创新团队联合国内外研究机构开发出一种在真菌中实现多顺反子表达的系统,提升了真核细胞工厂合成工农业高价值化学品的原创设计能力。近日,相关研究成果发表在《自然通讯(Nature Communications)》上。 合成...
一、多顺反子：真核生物的创新解决方案 常规基因表达往往依赖单一质粒，但当需要同时表达多个基因时，问题就浮现了。混合法虽然理论上可行，但随机性高，且不能保证每个细胞都能精确接收。这时，多顺反子元件登场，它像一个巧妙的组合拳，解决了启动子大小、强弱平衡以及顺反子顺序表达的挑战。多顺反子...
多顺反子表达元件包括IRES元件和2A多肽元件，它们能够将多个基因串联表达于同一转录本中。IRES元件允许核糖体在mRNA内部的任意位置结合，从而实现不依赖帽子结构的翻译起始。而2A多肽元件通过自切割机制，将两个基因表达产物分离，显著提高串联基因表达效率。然而，多顺反子元件并非完美无缺。IRES元件的较大块头...
这些细胞被装载了多顺反子表达载体，这为在细胞中产生功能性的抗体提供了一个理想的平台。具体方法是，通过转染这种载体到哺乳动物细胞中，使得这些细胞能够按照预设的程序，高效地合成和分泌出具有生物学活性的抗体。这种新型的表达系统为多基因产物的生产开辟了新的途径，具有重要的科研和应用价值。