为真核生物设计高效且广泛适用的多顺反子表达系统,可降低基因构建的复杂性,简化多步菌株工程,并且有助于生物合成途径中的酶在所需发酵条件下以预定的水平同步表达。 中国农业科学院生物技术研究所微生物智能设计与合成创新团队联合芬兰Vtt技术...
合成生物学需要高效的系统来支持多个基因的良好协调的共表达。在这里,我们发现了一个9-bp的核苷酸序列可以在酵母和丝状真菌中实现高效的多顺反子基因表达。将多顺反子表达与多重的、无标记的、基于CRISPR/Cas9的基因组编辑相结合,我们开发了一种叫做HACKing的策略(CracKing基因进入基因组的高效且可访问系统)用于多基因...
在真核生物中,外源基因的转入需要选用特异的调节因子、启动子和终止子等转录表达元件,对代谢物生物合成途径的重构步骤较为繁复,并且不易预测和控制转入基因的表达。 为应对这种挑战,科研人员开发了真菌多顺反子表达系统。无需使用外源启动子及调控元件,通过选择已表征的宿主内源“驱动”基因,可预知转入合成途径的每个...
为应对这种挑战,科研人员开发了真菌多顺反子表达系统。无需使用外源启动子及调控元件,通过选择已表征的宿主内源“驱动”基因,可预知转入合成途径的每个基因的表达水平,进而可以在真菌中自动化重构代谢物生物合成途径。利用该系统,在酿酒酵母中精确表达了罗...
这些细胞被装载了多顺反子表达载体,这为在细胞中产生功能性的抗体提供了一个理想的平台。具体方法是,通过转染这种载体到哺乳动物细胞中,使得这些细胞能够按照预设的程序,高效地合成和分泌出具有生物学活性的抗体。这种新型的表达系统为多基因产物的生产开辟了新的途径,具有重要的科研和应用价值。
为应对这种挑战,科研人员开发了真菌多顺反子表达系统。无需使用外源启动子及调控元件,通过选择已表征的宿主内源“驱动”基因,可预知转入合成途径的每个基因的表达水平,进而可以在真菌中自动化重构代谢物生物合成途径。利用该系统,在酿酒酵母中精确表达了罗汉果醇生物合成途径的13个基因,实...阅读全文 合成生物...
本发明提供了一种通过双/多顺反子表达系统调控铁蛋白在细胞内自组装的方法,通过双顺反子表达系统或多顺反子表达系统,将含不同组分的铁蛋白亚基单体在原核生物内自组装,得到可控组装的融合表达铁蛋白。本发明利用多/顺反子表达系统,在一个细胞中同时表达融合铁蛋白亚基和野生型铁蛋白亚基,减少外源加入的大尺寸蛋白...
多顺反子表达系统在得到复杂蛋白质如抗体的有效原核合成和表达中可以是至关重要的。自从fda在1986年批准了莫罗单抗-cd3(muromonab-cd3)(仍然是可用于控制移植排斥的最有效免疫抑制药之一)(hooks等.pharmacotherapy,1991,vol.11(1),26-37)以来,全尺寸抗体和抗体片段成为了医药中越来越重要和通用的工具。虽然现有技术...
已描述了用于在大肠杆菌中产生蛋白质复合体的一般多顺反子表达系统(Selleck&Tan2008,见上;Tan.Protein.Expr.Purif.,2001,vol.21(1),224-234;Tan等.ProteinExpr.Purif.,2005,vol.40(2),385-395)。这些系统利用了翻译盒的概念,所述翻译盒由具有需要的起始密码子和终止密码子的编码区以及之前的翻译起始信号例如...
.2009文章编号:1673-3851(2009)04—0561—06构建多顺反子表达载体系统的新策略沈俊杰,单娟娟,骆菁菁,刘立,钱程(浙江理工大学生命科学学院,杭州310018)摘要:利用pSMl55一GFP载体为骨架质粒,构造IRES一2A联用结构,成功实现该结构向2A结构的简单切换,得到可以同时表达s心己NA和多基因、可切换多功能的真核表达...