STED显微技术作为第一个突破光学衍射极限的远场显微成像技术,其基本原理是采用两束激光同时照射样品,其中一束激光用来激发荧光分子,使物镜焦点艾里斑范围内的荧光分子处于激发态;同时,用另外一束中心光强为零的环形损耗激光与之叠加,使物镜焦点艾里斑边沿区域处于激发态的荧光分子通过受激辐射损耗过程返回基态而不自发辐...
多色受激辐射损耗超分辨显微技术(STED Nanoscopy)具有突破衍射极限的超高分辨率、成像速度快、无需特殊的闪烁荧光基团等优势,能够提供活细胞内生物分子的精确定位,是新兴的纳米尺度亚细胞研究重要工具。然而,活细胞多色STED显微技术的广泛应用仍然受限于缺乏抗漂白的荧光基团和复杂昂贵的成像设备。 STED显微术利用一束常规激...
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其中, 受激辐射损耗显微(stimulated emission depletion microscopy, STED)通过引入一束环形损耗光来抑制荧光光斑外围荧光分子的发光, 以达到减小点扩散函数的目的, 实现超分辨成像. 经过近些年的发展, STED系统无论从光束的产生、校准和扫描, 还是最后的成像, 都有...
近日,浙江大学光电科学与工程学院匡翠方、韩于冰研究团队提出了多重受激辐射损耗显微术(Multiplexed stimulated emission depletion nanoscopy),实现了纳米级分辨率的多色活细胞长时程成像。研究团队通过光谱特性相似但荧光寿命特性存在差异的荧光探...
获得2014年诺贝尔化学奖的受激辐射损耗(STED)显微镜作为一种典型的超分辨成像技术,在纳米尺度的生物成像领域引起研究人员的广泛兴趣。STED显微镜通过采用一束常规激发光和一束环形损耗光共同照射荧光分子来实现突破光学衍射极限的超分辨成像,其损耗光的强度往...
受激辐射损耗显微镜(stimulated emission depletion,sted)使用一束损耗光通过位相板的调制,形成损耗光斑,将激发光衍射光斑周围的荧光分子通过受激辐射耗尽转换为非辐射态,实现了好于50nm的空间分辨率。由于使用全光设置,图像采集时间与传统共聚焦显微镜相同,对样品准备没有特殊要求,因此可以实现活细胞内亚细胞结构的实时成像...
从而突破光学衍射极限,提高空间分辨率,在受激辐射损耗显微镜中,首先使用激发激光照射使处于基态的荧光分子进入激发态,然后引入一个波前呈环状的损耗激光,使该激光照射区域内的荧光分子通过受激辐射的方式返回基态,仅保留激发光斑中心区域的自发荧光信号,通过调节受激辐射损耗激光的强度和空间分布,可以将成像分辨率提高到几...
2、但现有的受激辐射损耗光学显微镜在实际应用中存在一定的限制:一、激发光为圆偏振光,不能实现荧光分子的各向异性激发;二、仅能实现荧光分子各向同性的激发和成像,不能探测两个偏振方向的荧光信号;三、不能同时实现荧光成像和荧光分子的各向异性测量。 技术实现思路 ...
1.本发明涉及显微成像技术领域,特别是涉及一种受激辐射损耗光学显微镜及其显微成像系统。 背景技术: 2.当今生命科学中的显微成像研究大约80%仍然使用光学显微镜,可以说生命科学的进步伴随着光学显微镜的发展。然而由于光学衍射极限的存在,使得光学显微镜的空间分辨率被限制在半个波长左右,这样的分辨率严重阻碍了生物学家们...