受激辐射损耗(STED)显微镜及其应用 师锦涛 袁景和 中国科学院化学研究所 分子纳米结构与纳米技术实验室 引言 细胞是生物体的基本组成单位,对细胞内部结构、相互作用以及动力学过程进行研究,有助于我们对生命本质的理解与探索。光学显微镜以及后来结合荧光标记发展起来的各种荧光显微成像技术,是在细胞水平研究生命科学和生物...
但在实际应用中sted显微镜会存在一些问题,诸如:光路复杂,难以实现小型化;难以维持激发光斑与sted光斑的高精度长时间稳定对准(纳米级);显微物镜对激发光和sted光有很大(60%以上)的能量损耗,因此sted超分辨显微镜需要选用较高功率的激光器;显微物镜对荧光信号产生较大的能量损失,降低荧光信号的探测灵敏度。 技术实现要素:...
但在实际应用中受激辐射损耗光学显微镜有四项问题,一、光路复杂,难以实现小型化;二、难以维持激发光斑与受激辐射损耗光斑的高精度长时间稳定对准(纳米级);三、受激辐射损耗光学显微镜对于生物样品的光毒性较大,往往经过受激辐射损耗光学显微镜成像后的生物样品会出现失活、光漂白等现象;四、受激辐射损耗光学显微镜采用...
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摘要:由于受到衍射极限的影响, 传统光学显微镜的分辨率被限制在半个波长左右. 近二十年来出现了许多通过不同方法绕过光学衍射极限的超分辨成像技术, 其中, 受激辐射损耗显微(stimulated emission depletion microscopy, STED)通过引入一束环形损耗光来抑制荧光光斑外围荧光分子的发光, 以达到减小点扩散函数的目的, 实现超...
然而,基于荧光寿命的多色STED目前只能应用于固定细胞中,其原因是难以(i)筛选出具有的亮度和抗漂白特性,适合 STED 成像的荧光标记物(ii)同时标记活细胞中的多个亚细胞结构,以及(iii)使用适当的分析方法来分离同一光谱通道中的不同荧光探针。...
受激辐射损耗显微成像(STED)是一种超分辨荧光显微成像技术,它能够突破传统光学衍射极限的限制,把远场光学分辨率提高到百纳米以内,被广泛应用于生物医学等领域,是目前... 魏通达,张运海,杨皓旻 - 《红外与激光工程》 被引量: 10发表: 2016年 受激辐射...
受激辐射损耗(STED)显微镜及其应用 师锦涛 袁景和 中国科学院化学研究所 分子纳米结构与纳米技术实验室 引言 细胞是生物体的基本组成单位,对细胞内部结构、相互作用以及动力学过程进行研究,有助于我们对生命本质的理解与探索。光学显微镜以及后来结合荧光标记发展起来的各种荧光显微成像技术,是在细胞水平研究生命科学和生物...
然而,基于荧光寿命的多色STED目前只能应用于固定细胞中,其原因是难以(i)筛选出具有的亮度和抗漂白特性,适合 STED 成像的荧光标记物(ii)同时标记活细胞中的多个亚细胞结构,以及(iii)使用适当的分析方法来分离同一光谱通道中的不同荧光探针...
受激辐射损耗显微镜(stimulatedemissiondepletion-sted)通过使用一束受激辐射损耗光形成空壳形状光斑,将激发光衍射光斑周围的荧光分子通过受激辐射耗尽转换为非辐射态,实现了好于50nm的空间分辨率。由于使用全光设置,图像采集时间与传统共聚焦显微镜相同,对样品准备没有特殊要求,因此可以实现活细胞内亚细胞结构的实时成像和...