直观观察到Clathrin和Caveolae内吞囊泡的半融合结构(如图3),并发现大多数在共聚焦模式下处于共定位的这两种囊泡,但在STED超分辨模式下并不存在共定位,这也直接说明传统共聚焦显微镜并不能真实反映细胞内处于衍射极限范围内的不同组分的位置关系。
然而,基于荧光寿命的多色STED目前只能应用于固定细胞中,其原因是难以(i)筛选出具有的亮度和抗漂白特性,适合 STED 成像的荧光标记物(ii)同时标记活细胞中的多个亚细胞结构,以及(iii)使用适当的分析方法来分离同一光谱通道中的不同荧光探针。...
摘要:由于受到衍射极限的影响, 传统光学显微镜的分辨率被限制在半个波长左右. 近二十年来出现了许多通过不同方法绕过光学衍射极限的超分辨成像技术, 其中, 受激辐射损耗显微(stimulated emission depletion microscopy, STED)通过引入一束环形损耗光来抑制荧光光斑外围荧光分子的发光, 以达到减小点扩散函数的目的, 实现超...
受激辐射损耗显微镜(Stimulated Emission Depletion-STED)通过使用一束受激辐射损耗光形成空壳形状光斑,将激发光衍射光斑周围的荧光分子通过受激辐射耗尽转换为非辐射态,实现了好于50nm的空间分辨率。由于使用全光设置,图像采集时间与传统共聚焦显微镜相同,对样品准备没有特殊要求,因此可以实现活细胞内亚细胞结构的实时成像...
受激辐射损耗显微成像(STED)是一种超分辨荧光显微成像技术,它能够突破传统光学衍射极限的限制,把远场光学分辨率提高到百纳米以内,被广泛应用于生物医学等领域,是目前... 魏通达,张运海,杨皓旻 - 《红外与激光工程》 被引量: 10发表: 2016年 超分辨荧...
钙钛矿量子点因为具有优良的单色性、极高的量子效率以及通过成分调节可实现全可见光谱范围内发射波长等优良特性MT】，越来越广泛地应用于电脑及电视显示器等显示系统、荧光显微镜、太阳能电池等高新科技领域的光学器件中[4-W]o以共聚焦系统为代表的传统光学显微系统因为存在衍射极限的限制干扰,最大分辨率一般局限于200nm...
受激辐射损耗(STED)显微镜及其应用 师锦涛 袁景和 中国科学院化学研究所 分子纳米结构与纳米技术实验室 引言 细胞是生物体的基本组成单位,对细胞内部结构、相互作用以及动力学过程进行研究,有助于我们对生命本质的理解与探索。光学显微镜以及后来结合荧光标记发展起来的各种荧光显微成像技术,是在细胞水平研究生命科学和生物...
然而,基于荧光寿命的多色STED目前只能应用于固定细胞中,其原因是难以(i)筛选出具有的亮度和抗漂白特性,适合 STED 成像的荧光标记物(ii)同时标记活细胞中的多个亚细胞结构,以及(iii)使用适当的分析方法来分离同一光谱通道中的不同荧光探针...
受激辐射损耗显微成像(STED)是一种超分辨荧光显微成像技术,它能够突破传统光学衍射极限的限制,把远场光学分辨率提高到百纳米以内,被广泛应用于生物医学等领域,是目前... 魏通达,张运海,杨皓旻 - 《红外与激光工程》 被引量: 10发表: 2016年 受激辐射耗尽荧光显微镜的原理与实验装置研究进展 介绍了四能级系统的受...
STED显微镜的研究现状 STED显微技术作为第一个突破光学衍射极限的远场显微成像技术,其基本原理是采用两束激光同时照射样品,其中一束激光用来激发荧光分子,使物镜焦点艾里斑范围内的荧光分子处于激发态;同时,用另外一束中心光强为零的环形损耗激光与之叠加,使物镜焦点艾里斑边沿区域处于激发态的荧光分子通过受激辐射损耗...