双脱氧测序法又名Sanger双脱氧链终止法，是用以确定核酸中核苷酸序列的一个方法。Sanger法是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一个特定的碱基处终止，并且在每个碱基后面进行荧光标记，产生以A、T、C、G结束的四组不同长度的一系列核苷酸，然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测，从而获得可见DNA碱基序列的一种...
答:双脱氧的核苷酸是人造的分子,这种分子糖环的 2,和 3,碳上都没有了羟基基团,而在天然分子中糖环的 3,碳上有一个羟基。在 DNA复制中,新掺入的碱基按配对原则是天然三磷酸核苷酸,用它的 5'ct-P 同生长链的前一个核苷酸的 3,羟基连接。但是,若进入的核苷酸是双脱氧的,则由于 3’没有羟基而影响下一个...
双脱氧测序法是以DNA聚合酶为基础的测序技术。它利用DNA聚合酶的特性,在DNA合成过程中加入少量的双脱氧核苷酸(ddNTP),从而导致DNA链的终止。通过检测终止位置的ddNTP类型,就可以确定原始DNA的序列。 二、步骤详解 1. DNA提取和纯化:从待测序的样品中提取DNA,并经过一系列纯化步骤,以去除杂质和其他干扰物质。 2. DN...
它的原理是通过DNA聚合酶酶链终止法,将待测序列DNA复制成一系列不同长度的DNA片段,然后通过电泳技术将这些片段分离并测定其长度,最终得到DNA的序列信息。 双脱氧测序法的步骤如下: 1. DNA样本制备:首先,需要从待测序的DNA样本中提取纯净的DNA。通常使用化学方法或商用DNA提取试剂盒进行提取。 2. DNA扩增:将DNA...
这是双脱氧核苷酸可以用来终止DNA链的原因。具体来说,当聚合酶遇到一个ddNTP分子时,已有的DNA链上的碱基添加到一个停止DNA链的位置,并且终止DNA合成。因此,这种技术利用了双脱氧核苷酸的特殊性质,使得在DNA复制和测序中,我们可以区分和标识出不同的碱基。 2.标记DNA链 对于DNA测序来说,首先要做的是通过标记DNA链...
【考点】双脱氧链终止法的原理和方法。【解析】英国剑桥大学分子生物学实验室的F.Sanger在1977年发明了用DNA聚合酶的双脱氧链终止原理测定DNA的序列的方法。由于这种方法要求使用一种单链DNA模板和一种适当的DNA引物,因此也被称为引物合成法或酶催引物合成法。【答案】原理:双脱氧的核苷酸是人造的分子,这种分子糖环...
双脱氧终止法测序技术的原理?相关知识点: 试题来源: 解析 答:利用ddNTP与普通dNTP不同之处:双脱氧核糖的3'位置缺少一个羟基。双 脱氧核糖在DNA聚合酶作用下通过其5'三磷酸基团掺入到正在延伸的 DNA 链中,但由于没有3'羟基,它们不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键,因此, 正在延伸的DNA链终止。这样,在DNA合成...
一、双脱氧法测序的原理 DNA序列是生物遗传信息的重要组成部分,而DNA测序就是确定DNA序列的过程。双脱氧法测序是一种基于化学反应的DNA测序技术,其原理基于DNA的复制过程中的碱基互补特性和DNA聚合酶的活性。 DNA复制是生物体内的一个常见过程,其过程中DNA聚合酶通过读取DNA模板链的信息,将新的DNA链合成与模板链互补...