所以,miRNA-X本身的序列,就是qPCR的正向引物。qPCR引物都是DNA,只有T没有U碱基。 因为miRNA是RNA没有T,只有U,把U变为T就是qPCR的正向引物。 PolyA加尾法逆转录,在所有miRNA的尾巴A后面加了相同的序列,所以,反向引物都是相同的,厂家的试剂盒都会配备,不用管。 那下面只要找到miRNA-X本身的序列,把U变为T就是...
无论是茎环法还是加尾法,其引物的设计最终要得到“一对半”,“一对”是指PCR扩增的上下游引物,“半”是反转录引物。这3个引物是完成整个实时定量实验所必须的。比较一下2种方法所设计出的引物,不难发现,加尾法的引物设计起来更加容易,当要测定的miRNA种类很多时,加尾 法的优势就更加明显了。在反转录引物上,...
所以,miRNA-X本身的序列,就是qPCR的正向引物。qPCR引物都是DNA,只有T没有U碱基。 因为miRNA是RNA没有T,只有U,把U变为T就是qPCR的正向引物。 PolyA加尾法逆转录,在所有miRNA的尾巴A后面加了相同的序列,所以,反向引物都是相同的,厂家的试剂盒都会配备,不用管。 那下面只要找到miRNA-X本身的序列,把U变为T就是...