在核质分离实验中,合适的内参蛋白对于确保核质分离的纯度和实验结果的可靠性至关重要。 细胞质中的常用内参如 GAPDH(分子量36 kDa)、β-actin(分子量42 kDa)和 Tubulin(分子量50-55 kDa)稳定表达且特异性强,能有效验证细胞质部分的纯度;而 Lamin B1(分子量66 kDa)、Histone H3(分子量15 kDa)和 TBP(分子量3...
3.目的蛋白表达部位蛋白检测中有一类表达部位比较特殊的蛋白---核蛋白,针对核蛋白的定量,目标蛋白为核蛋白时就选择合适的核蛋白内参。一般我们常用的核内参抗体为Lamin A、Lamin B、Histone H3,另外多见于文献的核蛋白内参还有PCNA、K70、K80,Erk2、TATA binding protein(TBP)以及c-Jun、c-Fos等都有使用。而对于...
1. 肌动蛋白聚合物的检测在生理条件下，球状肌动蛋白（G-actin）很容易聚合成丝状肌动蛋白（F-actin），同时发生 ATP 水解（图1）。肌动蛋白在体外可以从两端聚合，由于聚合速度快慢的差异，导致肌动蛋白丝具有内在极性，我们通常将聚合速度快的一端称为正端或倒钩端，而聚合速度慢的那一端称为负端或尖端。...
🌟 整个蛋白内参: - a-微管蛋白 - β-肌动蛋白 - GAPDH - 亲环素B🔥 线粒体内参: - HSP60 - COXIV💎 细胞核内参: - 核纤层蛋白B1 - HDAC - PCNA - 组蛋白H3🤔 如何选择合适的内参? 1️⃣ 看分子量大小:内参与目的蛋白分子量应有差异,避免选择接近的。 2️⃣ 了解表达水平:内参蛋白应...
其中,β-actin常被用作内参蛋白,从而被大家所熟知,它可以作为实验中蛋白负载量和表达水平的标准参照物。在WB实验过程中,通过检测和对比目标蛋白与β-肌动蛋白的相对表达水平,可以对目标蛋白的表达进行定量和比较。然而,Actin的作用远远不止内参蛋白那么简单,根据Nature、Science、Cell等知名期刊上发布的相关研究结果表明...
内参蛋白主要是一些持家基因，这些持家基因执行大量的基本功能，并持续在多种组织和细胞中高水平表达。 常见内参蛋白包括 Actin、Tubulin、GAPDH、Histone H3 等。但是，研究不同类型的蛋白，对内参的选择是有讲究的，如：1. 胞浆蛋白的内参与胞核蛋白的内参是不一样的；2. 在一定的实验条件下，内参蛋白的表达发生...
其中,β-actin常被用作内参蛋白,从而被大家所熟知,它可以作为实验中蛋白负载量和表达水平的标准参照物。在WB实验过程中,通过检测和对比目标蛋白与β-肌动蛋白的相对表达水平,可以对目标蛋白的表达进行定量和比较。然而,Actin的作用远远不止内参蛋白那么简单,根据Nature、Science、Cell等知名期刊上发布的相关研究结果表明...
内参的选择 在western blot(WB)实验中内参蛋白是非常重要且必须的一部分,内参蛋白通常是由细胞中管家基因编码的蛋白,内参保证了每个泳道中蛋白上样量相同,不同泳道上的蛋白以相同的效率从凝胶转到膜上,不同泳道上抗体孵育(包括一抗和二抗)、信号检测都是一致的,是量化目的蛋白相对表达量的重要标尺。
在Western Blot分析中,若内参蛋白显现而目的蛋白未显现条带,这通常指向实验操作中的一些问题。首先,要考虑总蛋白浓度测量是否准确,以及在蛋白质样品上样时是否存在操作差异。这些都可以通过校正每个样品实际转移到膜上的内参蛋白量来纠正。 内参蛋白,通常是某个内源表达的蛋白,用于作为实验的稳定参照。通常选取管家基因...