huayunbio #广州华韵生物科技有限公司# 【超有用】5种常见内参蛋白及选择攻略 在Western Blot实验中,内参蛋白的选择非常重要,但如何正确地选择呢?小编整理了五种内参蛋白以及选择攻略~✔GAPDH✔β-Actin✔Lamin B✔Histones✔α-Tubulin赶紧收藏进小口袋吧广州华韵生物科技有限公司 ...
在核质分离实验中,合适的内参蛋白对于确保核质分离的纯度和实验结果的可靠性至关重要。 细胞质中的常用内参如 GAPDH(分子量36 kDa)、β-actin(分子量42 kDa)和 Tubulin(分子量50-55 kDa)稳定表达且特异性强,能有效验证细胞质部分的纯度;而 Lamin B1(分子量66 kDa)、Histone H3(分子量15 kDa)和 TBP(分子量3...
由于内参的这种特性,所以要求被选择的内参蛋白在各个组织细胞中表达相对恒定,这样就不会因为外部条件变化而引起表达量的波动。我们常选择管家基因表达的蛋白作为内参,其稳定的特性让它能很好的监控整个实验体系是否正常。这也是为啥实验结果出现异常,师兄师姐以及厂家技术支持第一个问题就会问我们是否设置内参,或者内参是否...
1. 肌动蛋白聚合物的检测在生理条件下,球状肌动蛋白(G-actin)很容易聚合成丝状肌动蛋白(F-actin),同时发生 ATP 水解(图1)。肌动蛋白在体外可以从两端聚合,由于聚合速度快慢的差异,导致肌动蛋白丝具有内在极性,我们通常将聚合速度快的一端称为正端或倒钩端,而聚合速度慢的那一端称为负端或尖端。...
在western blot(WB)实验中内参蛋白是非常重要且必须的一部分,内参蛋白通常是由细胞中管家基因编码的蛋白,内参保证了每个泳道中蛋白上样量相同,不同泳道上的蛋白以相同的效率从凝胶转到膜上,不同泳道上抗体孵育(包括一抗和二抗)、信号...
常见内参蛋白包括 Actin、Tubulin、GAPDH、Histone H3 等。下图归纳了不同细胞组分对应的内参及其分子量,掌握了这张图,内参选择不再难。 表1. 不同细胞组分对应的内参蛋白及其分子量 CST 精选内参抗体列表(上下滑动查看): * 除个别品种,大部分现货备库。一...
内参蛋白主要是一些持家基因,这些持家基因执行大量的基本功能,并持续在多种组织和细胞中高水平表达。 常见内参蛋白包括 Actin、Tubulin、GAPDH、Histone H3 等。但是,研究不同类型的蛋白,对内参的选择是有讲究的,如:1. 胞浆蛋白的内参与胞核蛋白的内参是不一样的;2. 在一定的实验条件下,内参蛋白的表达发生...
其中,β-actin常被用作内参蛋白,从而被大家所熟知,它可以作为实验中蛋白负载量和表达水平的标准参照物。在WB实验过程中,通过检测和对比目标蛋白与β-肌动蛋白的相对表达水平,可以对目标蛋白的表达进行定量和比较。然而,Actin的作用远远不止内参蛋白那么简单,根据Nature、Science、Cell等知名期刊上发布的相关研究结果表明...
其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes the homing of endothelial progenitor cells to hepatocellular ...