在western blot(WB)实验中内参蛋白是非常重要且必须的一部分,内参蛋白通常是由细胞中管家基因编码的蛋白,内参保证了每个泳道中蛋白上样量相同,不同泳道上的蛋白以相同的效率从凝胶转到膜上,不同泳道上抗体孵育(包括一抗和二抗)、信号检测都是一致的,是量化目的蛋白相对表达量的重要标尺。 插叙:前期我们有推送过蛋白...
为您的特定组织或细胞模型找到合适的内参蛋白。 4,BioGPS(http://biogps.org):基因和蛋白质功能的基因注释门户网站(人类、啮齿动物和其他模型)。 5,Human Protein Atlas(http://www.proteinatlas.org):使用整合(组学)技术描绘细胞、组织和器官中的人类蛋白质图谱;可查询组织和...
(3)目的蛋白表达部位,全细胞和胞浆蛋白、胞核蛋白、核膜蛋白、线粒体蛋白等都有对应的内参蛋白供选择; (4)实际的实验环境,比如某些细胞中,由于组织缺氧、糖尿病等因素会导致GAPDH的表达增高;在凋亡实验时,Lamin B1等不适合作为内参;在加入抗癌和抗真菌药物时,β-Tubulin的表达易受影响,不适合作为内参;(5)组织特...
内参蛋白主要是一些持家基因,这些持家基因执行大量的基本功能,并持续在多种组织和细胞中高水平表达。 常见内参蛋白包括 Actin、Tubulin、GAPDH、Histone H3 等。 但是,研究不同类型的蛋白,对内参的选择是有讲究的,如: 1. 胞浆蛋白的内参与胞核蛋白的内参是不一样的; 2. 在一定的实验条件下,内参蛋白的表达发生明...
作为内参抗体,β-Tubulin表达通常很稳定,是最常见的内参蛋白之一,由于其稳定的性质也常被用于免疫荧光(Immunofluorescence, IF)中观察细胞的微管结构 GAPDH GAPDH,全称(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)或者甘油醛-3-磷酸脱氢酶,实际上它是糖酵解反应中的一种酶,在所有组织细胞中都呈现高表达,在同一细胞或者组织...
其中，β-actin常被用作内参蛋白，从而被大家所熟知，它可以作为实验中蛋白负载量和表达水平的标准参照物。在WB实验过程中，通过检测和对比目标蛋白与β-肌动蛋白的相对表达水平，可以对目标蛋白的表达进行定量和比较。然而，Actin的作用远远不止内参蛋白那么简单，根据Nature、Science、Cell等知名期刊上发布的相关研究...
在western blot(WB)实验中内参蛋白是非常重要且必须的一部分,内参蛋白通常是由细胞中管家基因编码的蛋白,内参保证了每个泳道中蛋白上样量相同,不同泳道上的蛋白以相同的效率从凝胶转到膜上,不同泳道上抗体孵育(包括一抗和二抗)、信号...
作为内参抗体,β-Tubulin表达通常很稳定,是最常见的内参蛋白之一,由于其稳定的性质也常被用于免疫荧光(Immunofluorescence, IF)中观察细胞的微管结构 GAPDH GAPDH,全称(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)或者甘油醛-3-磷酸脱氢酶,实际上它是糖酵解反应中的一种酶,在所有组织细胞中都呈现高表达,在同一细胞或者组织...
其中,β-actin常被用作内参蛋白,从而被大家所熟知,它可以作为实验中蛋白负载量和表达水平的标准参照物。在WB实验过程中,通过检测和对比目标蛋白与β-肌动蛋白的相对表达水平,可以对目标蛋白的表达进行定量和比较。然而,Actin的作用远远不止内参蛋白那么简单,根据Nature、Science、Cell等知名期刊上发布的相关研究结果表明...
其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes th...