最常用有效的方法,是可以根据RNA测序或者基因芯片的表达量结果来筛选候选的内参基因。比如,筛选不同细胞类型、不同组织、不同处理条件下稳定表达的基因作为候选内参基因。 常用的内参基因筛选软件有geNorm、NormFinder和BestKeeper,这三种软件都是专门用于筛选内参基因稳定性的软件,但这3种软件的使用方法和分析的侧重点各不...
在选择管家基因作为内参时,首先要按不同类型的分子选择正确的内参。曾看到有人用检测miRNA时选择了GAPDH作为内参呢。 a、检测mRNA时的内参 通常使用的是GAPDH、beta-actin、tubulin GAPHD GAPDH GAPDH是糖酵解反应中的一个酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa。该酶基因为管家(house keeping)基因,几乎在所有...
在选择管家基因作为内参时,首先要按不同类型的分子选择正确的内参。曾看到有人用检测miRNA时选择了GAPDH作为内参呢。 a、检测mRNA时的内参 通常使用的是GAPDH、beta-actin、tubulin GAPHD GAPDH GAPDH是糖酵解反应中的一个酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa。该酶基因为管家(house keeping)基因,几乎在所有...
在选择管家基因作为内参时,首先要按不同类型的分子选择正确的内参。曾看到有人用检测miRNA时选择了GAPDH作为内参呢。 a、检测mRNA时的内参 通常使用的是GAPDH、beta-actin、tubulin GAPHD GAPDH GAPDH是糖酵解反应中的一个酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa。该酶基因为管家(house keeping)基因,几乎在所有...
在选择管家基因作为内参时,首先要按不同类型的分子选择正确的内参。曾看到有人用检测miRNA时选择了GAPDH作为内参呢。 a、检测mRNA时的内参 通常使用的是GAPDH、beta-actin、tubulin GAPHD GAPDH GAPDH是糖酵解反应中的一个酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa。该酶基因为管家(house keeping)基因,几乎在所有...
关于内参基因的选择 关于内参基因的选择 实验内参，即是在检测细胞内分子表达变化时选择的参照物，其在细胞内的表达相对恒定，在处理因素作用条件下不会发生表达改变的基因。内参同样可以校正上样量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。1、管家基因 最普通的内参是内源性参照基因，也就是管家基因（...
关于内参基因的选择 关于内参基因的选择 实验内参，即是在检测细胞内分⼦表达变化时选择的参照物，其在细胞内的表达相对恒定，在处理因素作⽤条件下不会发⽣表达改变的基因。内参同样可以校正上样量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。1、管家基因 最普通的内参是内源性参照基因，也就是管家...
关于内参基因的选择 实验内参,即是在检测细胞内分子表达变化时选择的参照物,其在细胞内的表达相对恒定,在处理因素作用条件下不会发生表达改变的基因。内参同样可以校正上样量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性。 1、管家基因 最普通的内参是内源性参照基因,也就是管家基因(持家基因,house keeping gen...
关于内参基因的选择 实验内参,即是在检测细胞内分子表达变化时选择的参照物,其在细胞内的表达相对恒定,在处理因素作用条件下不会发生表达改变的基因。内参同样可以校正上样量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性。 1、管家基因 最普通的内参是内源性参照基因,也就是管家基因(持家基因,house keeping gen...
大家都知道,内参基因的作用就是去除不同样本在RNA产量、质量以及逆转录效率上可能存在的差别,从而获得目的基因特异性表达的真正差异。所以,我们会选择内参基因进行校正和标准化。通常我们选择内参基因的标准是①高度或中度表达,排除太高或者太低;②表达水平不受任何外源性因素等影响;③不存在假基因。