保护碱基的作用 1. 提高酶切效率 在分子克隆实验中,有时我们会在待扩增的目的基因片段两端加上特定的酶切位点,用于后续的酶切和连接反应。由于直接暴露在末端的酶切位点不容易直接被限制性核酸内切酶切开,因此在设计PCR引物时,人为地在酶切位点序列的5'端外侧添加额外的碱基序列,即保护碱基,用来提高将来酶切时的...
内切酶保护碱基表是一种记录内切酶切割位点的表格。通过内切酶对特定碱基序列的识别,可以将切割位点记录在保护碱基表中。保护碱基表以碱基的序号和切割位点的相对位置来表示。例如,给定一个DNA序列,如果内切酶识别的切割位点位于该序列的第10号碱基之前两个碱基的位置,那么在保护碱基表中相应的位置会标注为-2。 内切酶保...
内切酶 碱基数目和酶切活性(% ) 1 2 3 4 5 AarI 20-50 50-100 AasI 50-100 AatII 0 0-20 20-50 50-100 Acc65I 0-20 50-100 AdeI 50-100 AjiI 50-100 AluI 0-20 20-50 50-100 Alw21I 50-100 Alw26I 50-100 Alw44I 0 20-50 50-100 ApaI 50-100 BamHI 50-100 BauI 0-20 ...
为了解不同内切酶对识别位点以外最少保护碱基数目的要求，NEB采用了一系列含识别序列的短双链寡核苷酸作为酶切底物进行实验。实验结果对于确定双酶切顺序将会有帮助（比如在多接头上切割位点很接近时），或者当切割位点靠近DNA末端时也很有用。在本表中没有列出的酶，则通常需在识别位点两端至少加上6个保护碱基，以...
3. 加保护碱基时最好选用切割率高时加的相应碱基。 附:pET-28a表达质粒酶切位点图谱EcoR I、Nde I、BamH I限制性内切酶使用说明(NEB) EcoR I Did you know this product can be customized or purchased in larger volumes?Submit an inquiry to find out more. Thenew and current Double Digest Finder ...
限制性内切酶保护碱基A-B时间:010-4-1811:1:04酶切效率:-0%-0-0%-0-50%-50-100%*-反应时间为16小时保护碱基数目酶1AarIAasIAatIIAcc65IAdeIAluIAlw1IAlw6IAlw44IApaIBamHIBcnIBclIBcuIBfiIBfmIBfuI0-5050-10000-050-100050-10050-100050-10050-1000-50050-10050-10050-10050
为了解不同内切酶对识别位点以外最少保护碱基数目的要求,NEB采用了一系列含识别序列的短双链寡核苷酸作为酶切底物进行实验。实验结果对于确定双酶切顺序将会有帮助(比如在多接头上切割位点很接近时),或者当切割位点靠近DNA末端时也很有用。在本表中没有列出的酶,则通常需在识别位点两端至少加上6个保护碱基,以确保酶...
为了解不同内切酶对识别位点以外最少保护碱基数目的要求, NEB 采用了一系列含识别序列的短双链寡核苷酸作为酶切底物进行实验。 实验结果对于确定双酶切顺序将会有帮助(比如在多接头上切割位点很接近时) , 或者当切割位点靠近DNA 末端时也很有用。 在本表中没有列出的酶, 则通常需在识别位点两端至少加上 6 个保...
限制性内切酶保护碱基A-B ??时间:2010-4-18 11:12:04 ??? ? 酶切效率: ? - 0% ? - 0-20% ? - 20-50% ? - 50-100% * - 反应时间为16小时酶保护碱基数目 1 2 3 4 5 AarI 20-50 50-100 AasI 50-100 AatII 0 0-20 20-50? 50-100 Acc65I 0-20 50-100 AdeI 50-100 AluI 0...
为了解不同内切酶对识别位点以外最少保护碱基数目的要求, NEB采用了一系列 含识别序列的短双链寡核苷酸作为酶切底物进行实验。实验结果对于确定双酶切顺序将会有帮助(比如在多接头上切割位点很接近时),或者当切割位点靠近DNA末端时也很有用。在本表中没有列出的酶,则通常需在识别位点两端至少加上6个保护碱基,以确...