由于直接暴露在末端的酶切位点不容易直接被限制性核酸内切酶切开,因此在设计PCR引物时,人为地在酶切位点序列的5'端外侧添加额外的碱基序列,即保护碱基,用来提高将来酶切时的活性。 2. 避免相邻酶切位点的干扰 在分子克隆实验中选择载体的酶切位点时,相邻的两个酶切位点往往不能同时使用,因为一个位点切割后留下...
在分子克隆实验中，有时我们会在待扩增的目的基因片段两端加上特定的酶切位点，用于后续的酶切和连接反应。由于直接暴露在末端的酶切位点不容易直接被限制性核酸内切酶切开，因此在设计PCR引物时，人为的在酶切位点序列的5‘端外侧添加额外的碱基序列，即保护碱基，用来提高将来酶切时的活性。其次，在分子克隆实验中...
为了解不同内切酶对识别位点以外最少保护碱基数目的要求,NEB采用了一系列含识别序列的短双链寡核苷酸作为酶切底物进行实验。实验结果对于确定双酶切顺序将会有帮助(比如在多接头上切割位点很接近时),或者当切割位点靠近DNA末端时也很有用。在本表中没有列出的酶,则通常需在识别位点两端至少加上6个保护碱基,以确保酶...
内容提示: 限制性内切酶保护碱基 A-B 时间:2010-4-18 11:12:04 酶切效率 : - 0% - 0-20% - 20-50% - 50-100% * - 反应时间为 16 小时 保护碱基数目 酶 1 AarI AasI AatII Acc65I AdeI AluI Alw21I Alw26I Alw44I ApaI BamHI BcnI BclI BcuI BfiI BfmI BfuI 20-50 50-100 0 0-...
由于直接暴露在末端的酶切位点不容易直接被限制性核酸内 切酶切开, 因此在设计 PCR 引 物时, 人为的在酶切位点序列的 5‘端外侧添加额外的碱基序列, 即保护碱基, 用来提高将来酶切时的活性。 其次, 在分子克隆实验中选择载体的酶切位点时, 相临的两个酶切位点往往不能同时使用, 因为一个位点切割后留下...
限制性内切酶保护碱基A-B ??时间:2010-4-18 11:12:04 ??? ? 酶切效率: ? - 0% ? - 0-20% ? - 20-50% ? - 50-100% * - 反应时间为16小时酶保护碱基数目 1 2 3 4 5 AarI 20-50 50-100 AasI 50-100 AatII 0 0-20 20-50? 50-100 Acc65I 0-20 50-100 AdeI 50-100 AluI 0...
为了解不同内切酶对识别位点以外最少保护碱基数目的要求,NEB*用了一系列 含识别序列的短双链寡核苜酸作为酶切底物进行实验.实验结果对丁确定双酶切顺序将 会有帮助〔比方在多接头上切割位点很接近时〕,或者当切割位点靠近DNAC端时也很有 用.在本表中没有列出的酶,那么通常需在识别位点两端至少加上6个保护碱基...
限制性内切酶酶切拟位点及保护碱基 寡核苷酸近末端位点的酶切 (Cleavage Close to the End of DNA Fragments (oligonucleotides)) 为什么要添加保护碱基?在分子克隆实验中,有时我们会在待扩增的目的基因片段两端加上特定的酶切位点,用于后续的酶切和连接反应。由于直接暴露在末端的酶切位点不容易直接被限制性核酸...
1、寡核甘酸近末端位点的幅切(Cleavage Close to the End of DNA Fragments (oligonucleotides)为了解不同内切酶对识别位点以外最少保护碱基数目的要求,NEB 采用了一系列含识别序列的短双链寡核甘酸作为酶切底物进行实验。实验结果对于确定双酶切 顺序将会有帮助(比如在多接头上切割位点很接近时),或者当切割位点靠...
1、PCR设计引物时酶切位点的保护碱基表切割率 %酶寡核苷酸序列2 hr20 hrGGTCGAC C00Acc ICGGTCGAC CG00CCGGTCGAC CGG00CACATGT G00Afl IIICCACATGT GG9090CCCACATGT GGG9090GGCGCGCC9090Asc IAGGCGCGCC T9090TT GGCGCGCC AA9090CCCCGGG G5090Ava ICCCCCGGG GG9090TCCCCCGGG GGA9090CGGATCC G1025BamH ICGGG...