即检测针孔和光源针孔始终聚焦于同一点，使聚焦平面以外被激发的荧光不能进入检测针孔。激光共聚焦的工作原理简单表达就是它采用激光为光源，在传统荧光显微镜成像的基础上，附加了激光扫描装置和共轭聚焦装置，通过计算机控制来进行数字化图像采集和处理的系统。激光扫描共聚焦显微镜基本结构 激光扫描共聚焦显微镜系统主要包括...
共聚焦激光扫描显微镜的原理 1. 激光光源:激光具有单色性好、方向性强、亮度高和相干性强等特点。共聚焦激光扫描显微镜使用激光作为光源,能产生特定波长的光束,可精准聚焦到样品上极小的区域,即激光腰部,实现对样品中荧光分子的精确激发。例如,多谱线氩离子激光器可提供457nm、488nm和514nm的蓝绿光,氦氖绿激光器...
激光扫描共聚焦显微镜利用单色激光扫描束经过照明针孔形成点光源,对标本内焦平面上的每一点进行扫描,标本上的被照射点,在检测器的检测针孔处成像,由检测针孔后的光电倍增管逐点或逐线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像,照明针孔与检测针孔相对于物镜焦平面是共轭的。焦平面的点同时聚焦于照明针孔和检测针孔,焦...
LSCM的共聚焦原理是在激光扫描时,仅有激光束焦点所在的位置才会产生信号,这样就可以实现高分辨率的三维成像。通过样品与物镜之间的焦点大小来调节成像深度。 三、激光扫描共聚焦显微镜优点及应用 1.优点 LSCM具有成像分辨率高、具有一定深度的成像能力、可以在非透明体中成像等优点。同时可以成像活细胞、胚胎、神经元等与...
1. 共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）的原理 共聚焦显微镜的工作原理是采用点光源照射标本，在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点，该点被照射后发出的荧光被物镜收集，并沿原照射光路回送到由双向色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔，分别称为照明针孔和探测针孔，两者...
1.激光光源作用(15%):提供单色性好、方向性强的激发光,波长选择需匹配荧光染料吸收光谱。解析:氩离子激光器多线输出需配合声光可调谐滤光器(AOTF)进行波长选择。 2.扫描振镜工作原理(20%):二维反射镜偏转实现光束扫描,位置反馈系统确保定位精度。解析:检流计式振镜角度分辨率达0.1μrad,非线性误差需通过查找表校...
激光扫描共聚焦显微镜原理 激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)是一种高分辨率的显微镜技术,它利用激光束扫描样品表面,通过共聚焦来获得高质量的图像。 LSCM的原理是利用激光束扫描样品表面,激发样品中的荧光物质发出荧光信号,然后通过共聚焦来获得高质量的图像。共聚焦是指将激光束聚焦到样品表面上,使得样品表面上的荧光物质只...
激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)工作原理: 激光共聚焦显微镜(LSCM)脱离了传统光学显微镜的场光源和局部平面成像模式,采用激光束作光源,激光束经照明针孔,经由分光镜反射至物镜,并聚焦于样品上,对标本焦平面上每一点进行扫描。 组织样品中如果有可被激发的荧光物质,受到激发后发出的荧光经原来入射光路直接反向回到分光镜,通过...