即检测针孔和光源针孔始终聚焦于同一点，使聚焦平面以外被激发的荧光不能进入检测针孔。激光共聚焦的工作原理简单表达就是它采用激光为光源，在传统荧光显微镜成像的基础上，附加了激光扫描装置和共轭聚焦装置，通过计算机控制来进行数字化图像采集和处理的系统。激光扫描共聚焦显微镜基本结构 激光扫描共聚焦显微镜系统主要包括...
激光扫描共聚焦显微镜利用单色激光扫描束经过照明针孔形成点光源,对标本内焦平面上的每一点进行扫描,标本上的被照射点,在检测器的检测针孔处成像,由检测针孔后的光电倍增管逐点或逐线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像,照明针孔与检测针孔相对于物镜焦平面是共轭的。焦平面的点同时聚焦于照明针孔和检测针孔,焦...
共聚焦激光扫描显微镜的原理 1. 激光光源:激光具有单色性好、方向性强、亮度高和相干性强等特点。共聚焦激光扫描显微镜使用激光作为光源,能产生特定波长的光束,可精准聚焦到样品上极小的区域,即激光腰部,实现对样品中荧光分子的精确激发。例如,多谱线氩离子激光器可提供457nm、488nm和514nm的蓝绿光,氦氖绿激光器...
激光扫描共聚焦显微镜的工作原理如下: 光源与扫描:利用单色激光束经过照明针孔形成点光源,对标本内焦平面上的每一点进行逐点扫描。 荧光激发与收集:当激光照射到样品上的特定点时,如果该点存在可被激发的荧光物质,荧光物质被激发后发出荧光。这些荧光通过原入射光路直接反向回到检测器。 共轭聚焦:在检测器端,荧光通过...
1.激光光源作用(15%):提供单色性好、方向性强的激发光,波长选择需匹配荧光染料吸收光谱。解析:氩离子激光器多线输出需配合声光可调谐滤光器(AOTF)进行波长选择。 2.扫描振镜工作原理(20%):二维反射镜偏转实现光束扫描,位置反馈系统确保定位精度。解析:检流计式振镜角度分辨率达0.1μrad,非线性误差需通过查找表校...
即检测针孔和光源针孔始终聚焦于同一点，使聚焦平面以外被激发的荧光不能进入检测针孔。图一 激光扫描共聚焦显微镜的原理图 共聚焦激光扫描显微镜主要特点在于其光学分层能力，即获得特定深度下焦点内的图像。图像通过逐点采集，以及之后的计算机重构而成。因此它可以重建拓扑结构复杂的物体。对于不透明样品，可以进行表面...
激光扫描共聚焦显微镜原理 激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)是一种高分辨率的显微镜技术,它利用激光束扫描样品表面,通过共聚焦来获得高质量的图像。 LSCM的原理是利用激光束扫描样品表面,激发样品中的荧光物质发出荧光信号,然后通过共聚焦来获得高质量的图像。共聚焦是指将激光束聚焦到样品表面上,使得样品表面上的荧光物质只...
激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)工作原理: 激光共聚焦显微镜(LSCM)脱离了传统光学显微镜的场光源和局部平面成像模式,采用激光束作光源,激光束经照明针孔,经由分光镜反射至物镜,并聚焦于样品上,对标本焦平面上每一点进行扫描。 组织样品中如果有可被激发的荧光物质,受到激发后发出的荧光经原来入射光路直接反向回到分光镜,通过...
激光扫描共聚焦显微镜的主要部件是显微镜,它直接关系到系统的图像质量。显微镜的光路是一个没有离心机的光学系统,光学选项可以插入而不影响成像质量和测量精度。扫描控制系统由Z轴、X-Y焦平面、共焦针孔和光电倍增管四部分组成。激光扫描共聚焦显微镜具有高分辨率观察,可实现深聚焦,光斑半径最小为2㎛ 能清晰观察样品...