一、实验原理 免疫荧光(Immunofluorescence,IF)技术是集免疫学、生物化学和显微镜技术于一身的一项常用的免疫标记技术。将荧光物质(最常用的是荧光素)标记于抗原或抗体上,当其与相应抗体或抗原结合后,就会…
免疫荧光染色原理 免疫荧光(immunofluorescence, IF)技术通过标记抗体以荧光基团,生成荧光抗体作为检测工具,用以识别细胞或组织内的特定抗原(即靶蛋白)。借助荧光显微镜,可观测到荧光信号在细胞或组织中的分布,进而明确抗原的性质及其定位。优势在于能精确确定蛋白表达位置,并辅助评估蛋白表达量。 具体操作步骤 IF染色流程精...
根据染色方法的不同,免疫荧光技术可分为直接法和间接法两种,前者是直接将目的蛋白与荧光标记的一抗结合的一种方法,后者则是先将目的蛋白与一抗结合后再与荧光标记的二抗结合的一种方法,其中以间接法最为常用。此外,免疫荧光技术亦有细胞免疫荧光(IF-IC)、石蜡切片免疫荧光(IF-P),冰冻切片免疫荧光(IF-F)之分,...
1. 组织切片染色:IF技术常用于组织切片的染色,可以检测组织中的特定抗原;通过将组织切片制备成薄片,然后用荧光标记的抗体进行染色,可以观察到组织中的荧光信号,从而了解抗原的分布和表达。2. 细胞染色:IF技术也常用于细胞染色,可以检测细胞中的特定抗原;通过将细胞制备成涂片,然后用荧光标记的抗体进行染色,可...
免疫荧光(Immunofluorescence):简称IF,与western blotting一样,也是根据抗原抗体反应的原理,将不影响...
免疫荧光染色技巧。#图文伙伴计划2024 免疫荧光(IF)是一种用于检测以及识别细胞和组织中蛋白质和其他分子的亚细胞分布和迁移的强大检测技术。可用作免疫组织化学 (IHC)或免疫细胞化学(ICC) 中使用的传统显色标记的替代物#论文发表 # - Sci宝藏女孩⭐️于20240528
二、IF假阳性结果 原因:目标蛋白的荧光太强,甚至形成非特异性的标记,一些背景染色也可能被误认为阳性区域。这种情况一般出现在抗体浓度过高而漂洗又不充分的时候,多余的抗体会吸附在组织上,造成荧光图像整体高背景。 处理:适当降低一抗或者二抗的浓度,增加漂洗时间,一般...
一般来说,多重免疫荧光染色实验中二抗的选择条件比较多:1,要使用间接标记的荧光抗体 1)应用范围广;2)直接标记的一抗经过纯化后标记,拥有干净的背景,适用于多染,但在IF多染实验的实际应用中很有限,且身披不菲的价格,对个人的实验条件有一定限制。2,二抗种属来源需相同 这是为防止不同种属来源的二抗发生...
免疫荧光(if)实验-染色操作步骤发布于 2024-07-02 11:14・IP 属地湖北 · 170 次播放 赞同添加评论 分享收藏喜欢 举报 免疫荧光免疫荧光实验免疫荧光染色生物实验科研试剂 写下你的评论... 还没有评论,发表第一个评论吧
什么是IF(免疫荧光)染色?What is IF (Immunofluorescence) staining? 免疫荧光(IF)是一种用于检测以及识别细胞和组织中蛋白质和其他分子的亚细胞分布和迁移的强大检测技术。IF可用作免疫组织化学(IHC) 或免疫细胞化学 (ICC) 中使用的传统显色标记的替代物。通过使用多种标记物的二级抗体,可以研究感兴趣蛋白的共定位...