二抗结合 🔍 间接免疫荧光需要使用二抗。在室温下避光孵育1小时。然后用PBST漂洗3次,每次5分钟,再用蒸馏水漂洗一次。 封片及检测 🎯 滴加封片剂一滴,封片后,用荧光显微镜检查。通过以上步骤,你可以进行免疫荧光实验,检测细胞内的特定抗原。希望这篇指南对你有所帮助!0 0 发表评论 发表 作者最近动态 伯纳乌的小...
1️⃣1️⃣ 一抗孵育:将一抗与样本结合。 1️⃣2️⃣ 二抗孵育:将标记有荧光的二抗与一抗结合。 1️⃣3️⃣ DAPI染色:对细胞核进行染色,便于观察。 1️⃣4️⃣ 观察:在荧光显微镜下观察并记录结果。🔍 通过这些步骤,我们可以对样本进行深入的免疫荧光分析,了解其内部的抗原分布和...
步骤一：样本制备 在进行免疫荧光实验之前，首先需要准备好实验样本。通常情况下，样本可以是细胞培养物、组织切片或裂解后的细胞提取物。对于不同类型的样本，制备方法会有所差异，需要根据具体情况进行处理。步骤二：固定样本 固定样本是免疫荧光实验的关键步骤之一，主要目的是使样本中的蛋白质保持原有的结构和位置，...
（1） 阳性对照：阳性血清+荧光标记物；（2） 阴性对照：阴性血清+荧光标记物；（3） 荧光标记物对照：PBS+荧光标记物 如果标本自发荧光对照和特异性对照呈无荧光或弱荧光，待检标本呈强荧光，则为特异性阳性染色。4．一般标本在高压灯下照射超过3min，就有荧光减弱现象，经荧光染色的标本最好在当天观察，随着时间...
间接免疫荧光实验步骤通常包括以下几个方面: 01样品准备 贴壁细胞:将无菌盖玻片进行胶原浸泡后,用无菌的镊子放置到培养皿中并在其上铺设细胞,待细胞长到合适的密度(如60%~70%); 悬浮细胞:铺设在培养皿或者培养瓶中,生长至合适密度后收集含有悬浮细胞的培液;离心后弃掉培液; ...
免疫荧光技术是一种常用的细胞和分子生物学研究方法,通过荧光标记的抗体来检测特定蛋白质在细胞中的分布和定位。以下是免疫荧光实验的详细步骤,帮助你轻松上手。🔬✨ 贴壁/悬浮细胞处理 贴壁细胞:将细胞培养在共聚焦皿中,或制备细胞爬片。 悬浮细胞:使用甩片机或制备细胞涂片。 洗涤:用PBS洗涤细胞3次。 固定:用...
🔬 免疫荧光实验是一种常用的生物学研究方法,以下是详细的实验步骤:1️⃣ 细胞准备:对于单层生长细胞,在传代培养时将细胞接种到预先放置有处理过的盖玻片的培养皿中,待细胞接近长成单层后取出盖玻片,用PBS洗两次。对于悬浮生长细胞,取对数生长细胞,用PBS离心洗涤(1000rpm,5min)2次,用细胞离心甩片机制备细胞片...
免疫荧光检测方法 01 直接法 优点:操作简便,一步法,多染时不受抗体来源限制 缺点:信号强度低 02 间接法 优点:信号强度中等,适用于双重免疫染色 缺点:两步法,受抗体来源限制,背景可能变高 Tips:荧光标记二抗与一抗的种属要匹配 03 酪酰胺信号...
免疫荧光(IF)检测基本步骤: (1) 细胞准备。对单层生长细胞,在传代培养时,将细胞接种到预先放置有处理过的盖玻片的培养皿中,待细胞接近长成单层后取出盖玻片,PBS洗两次;对悬浮生长细胞,取对数生长细胞,用PBS离心洗涤(1000rpm,5min)2次,用细胞离心甩片机制备细胞片或直接制备细胞涂片。