以下是一般免疫荧光检测的基本步骤: 1. 样本准备:根据实验需求,准备适当的细胞、组织或切片样本。确保样本的质量和保存条件符合要求。 2. 固定和通透:使用适当的固定剂(如多聚甲醛)固定样本,以保持样本的形态和结构。对于细胞或组织样本,可能需要进行通透处理,以使抗体能够进入细胞内部。 3. 抗原修复:对于某些样本,...
标记过程:在这一步骤中,选择适当的荧光色素至关重要,因为它必须既不影响抗原-抗体的活性,也要有足够的稳定性和亮度,以便能在荧光显微镜下清晰观测。常用的荧光色素包括异硫氰酸荧光素(FITC)和四甲基罗丹明(TRITC)。 样本准备:样本的准备方法取决于被研究的细胞类型或组织。对于细胞样本,通常需要固定和透化处理以保...
4)用PBS震荡洗涤3次,每次5分钟,再用蒸馏水洗涤1次脱盐,冷风吹干; 5)用含1:3万的伊文思兰PBS按工作浓度稀释荧光结合物,滴加各孔(以覆盖细胞抗原面为准),在37℃水浴箱湿盒孵育30分钟; 6)同4)洗涤、漂洗、吹干; 7)荧光显微镜观察结果。 反馈 收藏 ...
1. 使用纤维连接蛋白(12.5 μg/mL浓度)对适用于细胞培养及高分辨率荧光成像的多孔玻璃底平板室温包被1小时。 2. 进行细胞接种(每孔10,000-25,000细胞)并在带有5.0% CO2的37°C湿润空气环境下培养20-24小时。 免疫染色 1. 去除生长培养基并用 PBS (8.1 mM Na2HPO4, 1.5 mM KH2PO4, 137 mM NaCl, 2.7...
免疫荧光(IF)检测基本步骤: (1) 细胞准备。对单层生长细胞,在传代培养时,将细胞接种到预先放置有处理过的盖玻片的培养皿中,待细胞接近长成单层后取出盖玻片,PBS洗两次;对悬浮生长细胞,取对数生长细胞,用PBS离心洗涤(1000rpm,5min)2次,用细胞离心甩片机制备细胞片或直接制备细胞涂片。
样品制备步骤如下：首先，使用12.5 μg/mL纤维连接蛋白对多孔玻璃底平板进行室温包被1小时，以适应细胞培养和高分辨率荧光成像。 接着，接种10,000-25,000个细胞在孔中，于37°C且5% CO2的湿润空气中培养20-24小时。 免疫染色步骤包括：移除培养基，用PBS洗涤细胞。 用4%多聚甲醛固定细胞1...
你好！以下是兽用干式免疫荧光分析仪DB-TRFR100的操作步骤：1. 打开仪器电源，待系统自检完毕后进入主界面。2. 准备好样本和试剂盒。按照试剂盒说明书中的操作步骤将样本加入到孔板中。3. 将孔板放置到分析仪的孔板托架上，并根据试剂盒要求选择相应的程序。4. 按下“开始测试”按钮，系统将自动进行...
1.一步双染色法先将两种荧光标{己抗体按适当比例混合(A+B),按直接法进行染色。 2.二步双染色法先用TRITC标记的A抗体进行免疫荧光染色,再用FITC标记的B抗体染色,根据两种抗体的动物种属不同,可用直接法也可用间接法,结果A抗原呈现橘红色荧光,而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中,常用的方法是免疫荧光组织化学中间接...
间接免疫荧光法测抗体 基本原理 染色程序分为两步，第一步，用未知未标记的抗体（待检标本）加到已知...