一、免疫组化技术的基本原理 应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究。 众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以其作为抗原或半...
免疫组化(IHC),是应用抗原抗体特异性结合以及显色反应,对组织细胞内抗原进行定位、定性及相对定量的实验手段。 ➤基本原理:免疫组化正是利用抗体和抗原之间高度特异性结合的原理,先用抗体将组织或细胞中的目的蛋白作为抗原特异性结合,再借助化学的方法将抗体结...
步骤一:标本固定 免疫组化的第一步是将待检测组织样本固定在载玻片或其他固定载物上。常用的固定剂包括福尔马林(formalin)和牛血清白蛋白(BSA)。固定的目的是保持组织的形态结构并防止其腐解。 步骤二:脱水和去蜡 接下来,固定的组织样本通常需要通过一系列酒精浓度逐渐脱水,然后使用组织蜡进行浸泡固化。蜡浸泡的目的...
免疫组化的原理基于抗原与抗体的特异性结合。抗原是指能够被免疫系统识别并引起免疫反应的分子,如蛋白质、多肽等。抗体是由B细胞分泌的一种具有特异性结合能力的分子,可以识别和结合到相应的抗原上。 在进行免疫组化实验时,首先需要选择一种特异性较高的一抗,使其与靶分子结合。然后加入来源于不同物种的二抗,使其...
在免疫组化中,主要包括抗原修复、特异性抗体结合、信号放大、染色和显微镜观察等步骤。 第一步:抗原修复 抗原修复是为了提高抗原的可见性,常见的修复方法有热原修复和化学原修复。热原修复是将组织样本在热压下加热一段时间,以恢复被固定、变性或交联的抗原的活性。化学原修复是使用化学试剂改变组织中蛋白分子的结构,...
其原理基于抗原与抗体之间的特异性结合。在进行免疫组化实验时,通常需经历如下步骤: 1.取样与制片:从待研究的组织或细胞中取得样本,并将其固定在载玻片或切片上,以便后续的实验处理。 2.抗原恢复:某些样本经过固定处理后,可能会造成抗原的损失或掩盖。因此,为了使抗原能更好地被抗体识别,常需要进行抗原恢复的步骤...
免疫酶组化技术是通过共价键将酶连接在抗体上,制成酶标抗体,再借酶对底物的特异催化作用,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,于普通显微镜或电镜下进行细胞表面及细胞内各种抗原成分的定位,根据酶标记的部位可将其分为直接法(一步法)、间接法(二步法)、桥联法(多步法)等,用于标记的抗体可以是用免疫...
免疫组化主要包括抗原修复、抗体染色和结果观察三个主要步骤。下面我们将详细介绍每个步骤的原理和操作流程。 抗原修复 抗原修复是免疫组化中的关键步骤之一。它的主要目的是使组织样本中的抗原蛋白恢复成可检测的状态。组织样本在经历固定处理后,抗原会发生变性和交联,导致其结构的改变,使其难以与抗体结合。因此,需要对...