一、免疫组化技术的基本原理 应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究。 众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以其作为抗原或半...
免疫组化(IHC),是应用抗原抗体特异性结合以及显色反应,对组织细胞内抗原进行定位、定性及相对定量的实验手段。 ➤基本原理:免疫组化正是利用抗体和抗原之间高度特异性结合的原理,先用抗体将组织或细胞中的目的蛋白作为抗原特异性结合,再借助化学的方法将抗体结...
免疫组化是一种常用于研究细胞和组织中蛋白质的定位、表达及定量的方法。其原理基于抗原与抗体之间的特异性结合。在进行免疫组化实验时,通常需经历如下步骤: 1.取样与制片:从待研究的组织或细胞中取得样本,并将其固定在载玻片或切片上,以便后续的实验处理。 2.抗原恢复:某些样本经过固定处理后,可能会造成抗原的损...
在免疫组化中,主要包括抗原修复、特异性抗体结合、信号放大、染色和显微镜观察等步骤。 第一步:抗原修复 抗原修复是为了提高抗原的可见性,常见的修复方法有热原修复和化学原修复。热原修复是将组织样本在热压下加热一段时间,以恢复被固定、变性或交联的抗原的活性。化学原修复是使用化学试剂改变组织中蛋白分子的结构,...
以下是免疫组化的步骤及其原理。 步骤一:标本固定 免疫组化的第一步是将待检测组织样本固定在载玻片或其他固定载物上。常用的固定剂包括福尔马林(formalin)和牛血清白蛋白(BSA)。固定的目的是保持组织的形态结构并防止其腐解。 步骤二:脱水和去蜡 接下来,固定的组织样本通常需要通过一系列酒精浓度逐渐脱水,然后...
免疫酶组化技术是通过共价键将酶连接在抗体上,制成酶标抗体,再借酶对底物的特异催化作用,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,于普通显微镜或电镜下进行细胞表面及细胞内各种抗原成分的定位,根据酶标记的部位可将其分为直接法(一步法)、间接法(二步法)、桥联法(多步法)等,用于标记的抗体可以是用免疫...
免疫组化是基于免疫学原理的一种实验方法,其核心原理是特异性抗体与待检测分子的免疫反应。免疫反应可分为两种类型:直接法和间接法。 1.直接法: 直接法是指特异性抗体直接与待检测分子发生免疫反应。在这种方法中,待检测物与特异性抗体结合后,通过标记在抗体上的标记物来直接检测待检测物的存在。常用的直接标记物...
本文将详细介绍免疫组化的步骤及原理。 二、免疫组化的步骤 1. 取材 首先需要取得需要检测的样本,可以是活体组织或固定后的切片。对于固定后的切片,需要进行脱水、透明化和包埋等处理。 2. 制备切片 将取得的样本制备成厚度为4-6μm的切片,并将其放置在载玻片上。然后进行脱蜡和再水化处理,以便后续步骤的顺利...