1. 免疫共沉淀-质谱技术的原理 免疫共沉淀-质谱技术是一种将免疫沉淀与质谱分析相结合的方法。其基本原理是利用特异性抗体对目标蛋白进行识别并与其结合，然后通过沉淀抗体-蛋白复合物来富集目标蛋白及其相互作用的蛋白分子。接下来，通过质谱分析技术，可以鉴定和定量免疫共沉淀样品中的蛋白质，进而揭示蛋白质相互作用网...
1. 免疫共沉淀-质谱技术的原理 免疫共沉淀-质谱技术是一种将免疫沉淀与质谱分析相结合的方法。其基本原理是利用特异性抗体对目标蛋白进行识别并与其结合,然后通过沉淀抗体-蛋白复合物来富集目标蛋白及其相互作用的蛋白分子。接下来,通过质谱分析技术,可以鉴定和定量免疫共沉淀样品中的蛋白质,进而揭示蛋白质相互作用网络。
免疫共沉淀-质谱联用技术基于免疫学的原理,即利用特异性抗体与靶分子结合形成复合物,从而寻找它的内在结构和功能。与传统的免疫共沉淀技术相比,免疫共沉淀-质谱联用技术可以对复合物进行更准确更全面的鉴定,可鉴定中小分子的低丰度蛋白质,可以同时定位蛋白质间的交互作用位点,还可以鉴定非蛋白质结合的水平等。 在免疫...
免疫共沉淀-质谱技术是一种将免疫沉淀与质谱分析相结合的方法。其基本原理是利用特异性抗体对目标蛋白进行识别并与其结合,然后通过沉淀抗体-蛋白复合物来富集目标蛋白及其相互作用的蛋白分子。接下来,通过质谱分析技术,可以鉴定和定量免疫共沉淀样品中的蛋白质,进而揭示蛋白质相互作用网络。 2. 免疫共沉淀-质谱技术的步骤...
多肽从头测序CO-IP免疫共沉淀法Far-Western Blot分析 蛋白质一级结构的测定 蛋白质组学 定量蛋白质组学Label-FreeiTRAQ, TMT, SILAC 半定量蛋白质组学2D-DIGE定量蛋白质组学SWATH定量蛋白组学 MRM/PRM定量蛋白组学4D蛋白质组学多肽组学 多肽质谱鉴定多肽生物标志物鉴定翻译后修饰蛋白组学 ...
2. 免疫共沉淀-质谱技术的步骤 步骤一:抗体结合 在免疫共沉淀-质谱技术中,首先需要选用与目标蛋白特异性结合的抗体。这些抗体可以事先与磁珠或琼脂糖等固相载体结合,形成免疫亲和柱。 步骤二:细胞裂解和免疫沉淀 细胞裂解是将样品中的蛋白质释放出来的关键步骤。细胞裂解液与免疫亲和柱结合,使目标蛋白与抗体结合形成...
简述免疫共沉淀的原理和免疫共沉淀耦联质谱技术的特点。 免疫共沉淀是利用特异性抗体和其特异性抗原相互作用的原理,将目标蛋白及其结合伴侣沉淀出来,从而寻找蛋白的相互作用伴侣或确认蛋白的位置等信息的技术方法。该方法作为识别蛋白相互作用伴侣的技术手段已经得到广泛使用。 免疫共沉淀耦联质谱技术是将免疫共沉淀技术和...
技术原理 基于无标记蛋白质组学技术,鉴定与目的蛋白相互作用的蛋白质。采用免疫共沉淀方法,以目的蛋白为诱饵,将目的蛋白抗体与样本内总蛋白共孵育,形成复合物,纯化后凝胶电泳分离蛋白。然后直接采取液相色谱-质谱联用,对酶解后肽段进行质谱分析。通过计算质谱信号响应强度或谱图数目,获取与目的蛋白相互蛋白的定量信息。
免疫共沉淀(Co-IP)是基于免疫学原理研究蛋白质相互作用的经典方法,通过使用靶蛋白特异性抗体来间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白,从而识别生理相关的蛋白-蛋白相互作用,并可通过质谱技术来鉴定新的相互作用蛋白质。 SILAC(Stable isotope labeling using amino acids in cell culture)细胞培养条件下稳定同位素标记技术是一...
用SILAC结合免疫共沉淀(CoIP)寻找相互作用蛋白是SILAC在定量蛋白质组学研究基础上的进一步应用,称之为SILAC-IP技术。该技术通过质谱鉴定和分析蛋白质相对量来判断是否是特异性结合诱饵蛋白,当实验组与对照组中某个蛋白质量含量达到统计学的差异时,就判定这个蛋白质与诱饵蛋白质具有相互作用。SILAC技术是先将实验组和对照...