免疫共沉淀-质谱技术是一种将免疫沉淀与质谱分析相结合的方法。其基本原理是利用特异性抗体对目标蛋白进行识别并与其结合，然后通过沉淀抗体-蛋白复合物来富集目标蛋白及其相互作用的蛋白分子。接下来，通过质谱分析技术，可以鉴定和定量免疫共沉淀样品中的蛋白质，进而揭示蛋白质相互作用网络。2. 免疫共沉淀-质谱技术的步...
免疫共沉淀-质谱联用技术基于免疫学的原理,即利用特异性抗体与靶分子结合形成复合物,从而寻找它的内在结构和功能。与传统的免疫共沉淀技术相比,免疫共沉淀-质谱联用技术可以对复合物进行更准确更全面的鉴定,可鉴定中小分子的低丰度蛋白质,可以同时定位蛋白质间的交互作用位点,还可以鉴定非蛋白质结合的水平等。 在免疫...
多肽从头测序CO-IP免疫共沉淀法Far-Western Blot分析 蛋白质一级结构的测定 蛋白质组学 定量蛋白质组学Label-FreeiTRAQ, TMT, SILAC 半定量蛋白质组学2D-DIGE定量蛋白质组学SWATH定量蛋白组学 MRM/PRM定量蛋白组学4D蛋白质组学多肽组学 多肽质谱鉴定多肽生物标志物鉴定翻译后修饰蛋白组学 ...
简述免疫共沉淀的原理和免疫共沉淀耦联质谱技术的特点。 免疫共沉淀是利用特异性抗体和其特异性抗原相互作用的原理,将目标蛋白及其结合伴侣沉淀出来,从而寻找蛋白的相互作用伴侣或确认蛋白的位置等信息的技术方法。该方法作为识别蛋白相互作用伴侣的技术手段已经得到广泛使用。 免疫共沉淀耦联质谱技术是将免疫共沉淀技术和...
技术原理 基于无标记蛋白质组学技术,鉴定与目的蛋白相互作用的蛋白质。采用免疫共沉淀方法,以目的蛋白为诱饵,将目的蛋白抗体与样本内总蛋白共孵育,形成复合物,纯化后凝胶电泳分离蛋白。然后直接采取液相色谱-质谱联用,对酶解后肽段进行质谱分析。通过计算质谱信号响应强度或谱图数目,获取与目的蛋白相互蛋白的定量信息。
免疫共沉淀(Co-IP)是基于免疫学原理研究蛋白质相互作用的经典方法,通过使用靶蛋白特异性抗体来间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白,从而识别生理相关的蛋白-蛋白相互作用,并可通过质谱技术来鉴定新的相互作用蛋白质。 SILAC(Stable isotope labeling using amino acids in cell culture)细胞培养条件下稳定同位素标记技术是一...
用SILAC结合免疫共沉淀(CoIP)寻找相互作用蛋白是SILAC在定量蛋白质组学研究基础上的进一步应用,称之为SILAC-IP技术。该技术通过质谱鉴定和分析蛋白质相对量来判断是否是特异性结合诱饵蛋白,当实验组与对照组中某个蛋白质量含量达到统计学的差异时,就判定这个蛋白质与诱饵蛋白质具有相互作用。SILAC技术是先将实验组和对照...
免疫共沉淀耦联质谱技术缺点 免疫共沉淀的缺点: (1)可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质-蛋白质相互作用; (2)两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用; (3)必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择最后检测的抗体,所以,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性。 (4)灵敏度...
免疫共沉淀耦联质谱技术(Immunoprecipitation coupled with mass spectrometry, IP-MS)是一种结合了免疫共沉淀和质谱技术的分析方法。其特点在于通过IP技术可以从大量异源性样品中选取特定蛋白质,然后通过质谱技术对所得蛋白质进行精细的定性和定量分析。此外,免疫共沉淀耦联质谱技术还可以用于研究蛋白质复合物的组成和蛋白质...
如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。 特点:研究的是生理条件下蛋白质之间的相互作用;检测的是细胞裂解液中所有蛋白质与靶蛋白的相互作用;可检测依赖于修饰的蛋白质相互作用。 复制 纠错举一反三 自然利润中心一般具有产品成本销售权、价格决策权、材料采购权。( ) A. 正确...