图1A的IP组结果显示，在第三组沉淀复合物样本中均检测到了Myc和Flag，表明protein A和protein B之间存在相互作用；图1B IP组的第三组样本中只有Flag，而没有检测到Myc，代表protein A和protein B之间不存在相互作用。文献案例分析 了解Co-IP结果图一般含义后，我们再结合文献案例实战分析Co-IP的结果。（案例均引...
对于内源性Co-IP实验验证两个已知蛋白(FBW7和YTHDF2)是否存在相互作用,如果最终的结果为阳性(可查看Input组,代表阳性结果),则可以证明两个蛋白之间存在相互关系,比如本文就验证了FBW7可以与YTHDF2结合,存在相互作用。反之,如果结果为阴性(可查看IgG组结果,代表阴性结果),则无法证明两个蛋白之间不存在相互作用,也有...
第二张胶图(IP:Flag,IB:Flag),表示的实验操作是利用anti-FLAG沉淀FLAG-ChREBP蛋白,图上显示经IB验证第二、第三组FLAG-ChREBP蛋白被成功沉淀下来,而第一组没有结果(第一组不存在FLAG-ChREBP蛋白),证明IP实验。3. Co-IP组Co-IP组:用来证明研究的2个蛋白是否存在互作。第一张胶图表示在anti-FLAG沉淀FLAG-...
Co-IP结果分析案例⼀ 该图为验证蛋⽩EDR1与蛋⽩EDR4之间是否存在相互作⽤的结果图。由图中可以得到，蛋⽩ EDR4带有GDP标签，蛋⽩EDR1带有FLAG标签，该实验为利⽤蛋⽩标签来沉淀和检测蛋⽩；该co-ip实验实验被分为两组，第⼀组存在GFP标签及EDR1-FLAG蛋⽩，第⼆组存在EDR4- GFP蛋⽩及...
图 Co-IP实验结果展示 撰写文章时，该实验可引用以下参考文献Isono E, Schwechheimer C. Co-immunoprecipitation and protein blots. Methods Mol Biol. 2010;655:377-387.Lin JS, Lai EM. Protein-Protein Interactions: Co-Immunoprecipitation. Methods Mol Biol. 2017;1615:211-219.Fang X, Copeland C, Xin...
Co-IP实验标准操作全流程、实验结果图解读、实验常见问题分析&解决、实际应用场景等 ,一文帮助大家掌握免疫共沉淀技术。 如果有任何Co-IP实验问题,可以加福麦斯生物的Co-IP实验互助群,0广告,有技术老师还有很多热心的同学一起探讨! 一、Co-IP实验原理
首先,需要确定融合标签的目的,蛋白纯化首选His-Tag,WB首选Flag-Tag,Co-IP可选择Flag-Tag或其他常用标签如HA、cMyc,活细胞成像则应该选择荧光蛋白等。 好了,两种比较经典的co-IP实验结果的图片解读今天就讲解完了。小薇提供语言润色、论文降重和专家评估,有需要的欢迎随时来撩~同事,有任何问题欢迎添加小薇VX随时沟通...
假阳性结果需要设置对应的阴性对照组一一排除，假设实验组为琼脂糖珠+抗体X+靶蛋白X+抗体Y+目的蛋白Y：※ 最后的实验结果是阴性的，是否能说明两个蛋白之间无相互作用？对于内源性Co-IP实验，阴性结果不能百分百说明无相互作用，也有可能是蛋白在细胞内表达过低导致，因此建议先做过表达Co-IP作为对照。
上次分享了免疫共沉淀的基本原理及实验对照设计原则,今天我们利用上次所学知识来尝试解读文献中的CO-IP结果图。 文献图解一 该图为验证蛋白EDR1与蛋白EDR4之间是否存在相互作用的结果图。由图可以得到的信息如下: ◆ 蛋白EDR4带有GFP标签,蛋白EDR1带有FLAG标签,该实验为利用蛋白标签来沉淀和检测蛋白; ...
首先需要说明的是,熟悉了解免疫共沉淀实验的原理及实验的操作流程是进行Co-IP结果图分析的前提。免疫共沉淀(Co-IP)是利用抗原与抗体之间的专一性作用为基础,用于研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的经典方法。相较于其他分子间相互作用检测方法(GST pull down 等),免疫...