免疫共沉淀常用于检验生理状态下蛋白质间的相互作用,通过与质谱(MS)联用可以用于鉴定发现新的相互作用蛋白。百泰派克利用SILAC方法分别标记实验组和对照组细胞后进行Co-IP实验,依靠抗原与抗体之间的专一性反应分离得到免疫复合物;再通过LC-MS/MS来定性/定量检测免疫复合物中的蛋白;当实验组与对照组中某个蛋白质的含量...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CoIP)是一项基于抗体特异性识别特定抗原的这一原理研究蛋白质相互作用的经典方法。免疫共沉淀常用于检验生理状态下蛋白质间的相互作用,通过与质谱(MS)联用可以用于鉴定发现新的相互作用蛋白。百泰派克利用SILAC方法分别标记实验组和对照组细胞后进行Co-IP实验,依靠抗原与抗体之间的专一性...
然后将精子膜蛋白分别与疾病组血清和对照组血清孵育,再分别加入蛋白A/G(Protein A/G)孵育,进行免疫共沉淀反应,采用SDS-PAGE对免疫沉淀复合物进行分离,切胶酶解后,进行液相色谱串联二级质谱分析,得到相应的蛋白ID.通过UniProt数据库检索查找这些蛋白的名称,生物学功能,细胞定位等信息.采用David软件对蛋白进行GO分类注释...