首先,你需要知道你的样品中蛋白质的浓度。这通常通过Bradford、BCA、Lowry等蛋白质浓度测定方法来实现。这些方法将提供一个蛋白质浓度的测量值,通常以微克/微升(µg/µl)为单位。一般来说,对于大部分的SDS-PAGE实验,每个样品孔的上样量通常在10-50微克之间。具体的上样量取决于你的实验目的和样品的性质。 一...
在进行SDS-PAGE电泳时，我们通常会在凝胶上点入蛋白质分子量Marker。在正常的情况下，经过染色和脱色处理后，我们至少应该能够看到Marker的条带。如果连Marker的条带都无法看到，那么问题很可能出现在电泳过程中。这可能是由于蛋白浓度不足、电泳时间不当（过长或过短）、仪器出现故障，或者正负极接反等原...
1.蛋白浓度不均匀: 如果样本中蛋白浓度不均匀,可能会在电泳过程中形成竖线。 2.杂质: 样本中的杂质可能与染料反应,导致泳道中出现竖线。 二、电泳操作问题 1.凝胶制备: 凝胶中的气泡或者不均匀的聚合可能导致泳道中的竖线。 2.电泳缓冲液: 缓冲液的组成不当或者新鲜度不足也可能导致这一现象。 3.加载量问题: ...
SDS能断裂分子内和分子间氢键，破坏蛋白质的二级和三级结构，强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂，蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中，与SDS分子按比例结合，形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物，这种复合物由于结合大量的SDS，使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离...
1您好,关于【蛋白质SDS-PAGE电泳分离胶和浓缩胶的浓度如何确定?上样缓冲液的倍数如何确定?你可不可以说清楚一点,我没做过蛋白电泳,不太清楚您说的什么,比如【几百的很大的用6的胶小蛋白12的10的一般都能跑】6的12的10的是指的什么 2 您好,关于【蛋白质SDS-PAGE电泳分离胶和浓缩胶的浓度如何确定?上样缓冲...
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染色后，还需要脱色液（有乙醇、醋酸）脱色，不脱色的话全是蓝色，不能区分条带。脱色后，条带才能显示出来。在跑SDS-PAGE时，需要点Marker，正常情况在染色、脱色后能至少看到Marker的条带。如果Marker都没有，那就是电泳问题了。蛋白浓度不够、跑胶的时间过长或过短、仪器问题、正负极不要插反。
我是做真菌粗酶液的SDS-PAGE蛋白电泳，mark条带能跑出来，条带清晰度也很不错，但是样品条带没有跑...
SDS-PAGE蛋白电泳配胶不凝固做SDS-PAGE蛋白电泳配胶 12%的分离胶30分钟左右能凝固但配5%的浓缩胶分离胶时却不能凝固TEMED 加倍不凝固但AP加倍 可以凝
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