若用荧光分光光度计或流式细胞仪检测贴壁细胞,可先对贴壁细胞进行消化、收集,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。若用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜检测:直接参考悬浮细胞实验步骤方法即可。 注意事项: CCCP是一种线粒体电子传递链抑制剂,对人体有害,实验过程中一定要穿实验服并戴一次性手套操作,注意小心防护。 JC-1是...
线粒体膜电位分析试剂盒(JC-1 法)是一种常用于检测细胞线粒体膜电位变化的工具,以下是使用该试剂盒进行实验的一些注意事项:试剂准备与保存 保存条件:试剂盒应按照说明书要求的温度保存,一般为 2-8℃,避免冷冻,防止试剂失效。避免反复冻融:JC-1 染料等试剂在使用过程中应尽量避免反复冻融,否则可能会影响...
JC-1 (100×)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。JC-1探针装载完并洗涤后尽量在30 min内完成后续检测。在检测前需冰浴保存。CCCP为线粒体电子传递链抑制剂,对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内...
正常状态下,线粒体内负电荷丰富,TMRE进入细胞后聚集在线粒体基质中,发出明亮的橘红色荧光。当膜电位下降时,TMRE被释放到细胞质中,荧光强度降低。🔬 实验注意事项: 首次实验时,遵循说明书推荐的染料浓度进行操作。可根据实验条件进行梯度设置优化。 孵育前确保染料充分混匀,避免局部浓度过高导致背景过高。 孵育时间根...
但是,这种方法不能区分细胞凋亡或其他原因导致的线粒体膜电位的变化。 JC-1实验原理 实验步骤: 1、JC-1染色工作液的配制: 六孔板每孔所需JC-1染色工作液的量为1ml,其它培养器皿的JC-1染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50-100万细胞需0.5ml JC-1染色工作液。取适量JC-1,并用超纯水稀释。剧烈...
线粒体膜电位染色实验是利用荧光染料JC-1来测定线粒体膜电位的方法。JC-1是一种双荧光染料,它在低电位下形成绿色荧光单体形式,而在高电位下形成红色荧光聚集体形式。因此,在线粒体膜电位高时,JC-1会形成红色聚集体,而在线粒体膜电位低时,JC-1会形成绿色单体形式。通过测定JC-1的荧光强度比值,可以反映线粒体...
线粒体膜电位JC-1实验的原理主要基于JC-1染料对线粒体膜电位的特异性响应,具体如下: JC-1染料的特性。 JC-1是一种亲脂性阳离子荧光染料,它可以选择性地进入线粒体。在细胞内,其聚集状态和荧光特性会随着线粒体膜电位的变化而改变。 JC-1有两种存在形式,即单体和聚合物。在低膜电位状态下,JC-1主要以单体...
科学家在研究线粒体膜的功能时,先去除外膜,再用超声波破坏线粒体内膜,破裂的内膜自动闭合成小泡,然后用尿素处理这些小泡,实验流程如下图所示。请据图回答:(1)“内共生学说”
线粒体膜电位是衡量线粒体功能的重要指标,通常使用荧光探针或其他染料来进行检测。 以下是一个常见的实验流程: 1. 实验准备 设备和材料: 荧光显微镜或流式细胞仪 线粒体膜电位探针(如JC-1、TMRE或Rhodamine 123) 细胞培养设备 离心机 PBS缓冲液(磷酸盐缓冲盐水) ...
故线粒体基质中可能含有的化学成分有abdef。 结果一 题目 科学家在研究线粒体膜的功能时,先去除外膜,再用超声波破坏线粒体内膜,破裂的内膜自动闭合成小泡,然后用尿素处理这些小泡,实验流程如下图所示。请据图回答:F1(头部)-H'F。(部)HH HH'图ATP合成酶分子结构内膜破裂位置放大基质内膜超声波尿素00F0一F1...