充质干细胞外泌体,完成收集。 2.根据权利要求1所述的间充质干细胞外泌体的提取方法,其特征在于,步骤S1中,是 收集的利用不含外泌体的间充质干细胞完全培养基培养的脐带/胎盘间充质干细胞的培养 上清液。 3.根据权利要求2所述的间充质干细胞外泌体的提取方法,其特征在于,对收集的间充 ...
动物脐带间充质干细胞外泌体提取方法包括以下步骤:取动物脐带组织并对脐带间充质干细胞进行培养;外泌体的提取:使用完全培养基培养P3～P20代脐带间充质干细胞,收集上清液,对上清液进行离心去除死细胞和细胞碎片,过滤去除微粒,然后对上清液使用离心法沉淀外泌体;对外泌体沉淀使用PBS重悬后置于‑70～‑80℃环境下...
提取方法,具体涉及一种脐带间充质干细胞外泌体的提取方法,该方法包括以下步骤:S1,得到脐带间充质干细胞单细胞悬液,待细胞的融合度达到70～80%时,离心去除死细胞和沉淀,过滤得到上清液;S2,在上清液中加入聚乙二醇6000提取液,颠倒混匀后静置≥10h,离心去除上清,得到沉淀;S3,向沉淀中加入蔗糖溶液,离心,即得外泌体...
本发明公开了一种羊膜间充质干细胞来源的外泌体的提取方法及其应用.本发明外泌体通过对羊膜的分离,洗涤,除上皮细胞,剪碎,消化,离心取第二层悬液,重悬,接种培养以及后续的抽提制备等步骤得到.该外泌体在作为促进血管化新生骨形成的药物中的应用,能使得血管内皮细胞聚集,血管新生,进而重建微循环增加血流灌注,并且...
方法:应用试剂盒二次提取huc MSCs外泌体,凝胶电泳法及BCA蛋白定量法检测两次提取外泌体蛋白纯度与含量的不同;电镜及流式细胞仪鉴定外泌体.结果:凝胶电泳法及BCA蛋白定量法证实二次提取后外泌体蛋白纯度提高,形态特征明显,并高表达CD63及CD81蛋白.结论:间充质干细胞外泌体经过二次提取纯化后,纯度提高,可以更...
本发明公开了一种无菌大规模提取人脐带间充质干细胞外泌体的方法,通过细胞工厂可规模化获取脐带间充质干细胞的条件培养基,应用本实验室的连续供液系统,通过切向分流过滤可无菌的大规模提取脐带间充质干细胞外泌体;通过固定代次、固定批次、固定接种密度、固定细胞培养条
使用透射电镜观察外泌体形态,BCA法进行蛋白质定量,western blot检测外泌体表面标志物CD9、CD81、CD63的表达.结果与结论:①3种方法均可以从培养基中提取到间充质干细胞来源的外泌体,并且在透射电镜下观察到圆形或椭圆形的膜性小囊泡;②差速超速离心法提取的外泌体中的蛋白浓度和纯度最高,Exo Quick 试剂盒法...
本发明公开了一种带有人关节液间充质干细胞外泌体提取物的风湿骨痛疾病治疗注射剂包括以下组份:每1ml注射剂中含有500μl‑800μl的5%‑20%浓度的人关节液间充质干细胞外泌体提取物溶液,其余为5%浓度的葡萄糖和8.5%‑9%浓度的生理盐水,本发明还公开了一种带有人关节液间充质干细胞外泌体提取物的风湿骨...
1.一种含人间充质干细胞外泌体提取物的矽肺病治疗雾化剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤: (1)人间充质干细胞培养:从细胞库中选取P2-P6的人间充质干细胞复苏,接种批次记为第一批次、第二批次、第三批次,接种密度分别为最大融合度的50%-60%、35%-45%、20%-30%;培养细胞所用完全培养基为无酚红DMEM...
7.根据权利要求1所述的一种脂肪间充质干细胞外泌体提取和纯化的制备方法,其特征在于:二次酶解为收集步骤s4中得到的一次截留溶液,向其中加入去离子水,去离子水的质量为一次截留溶液质量的1-2倍,并向其中加入碱调节溶液ph值至7-7.5,搅拌均匀,然后加入木瓜蛋白酶进行酶解,得二次酶解液。