采用三种长片段测序技术Pacific Biosciences (Sequel I), Oxford Nanopore (PromethION、MinION) 和华大智造stLFR(single-tube Long Fragment Read)对夏威夷果(Macadamia jansenii)进行了基因组组装,并分别从组装结果的准确度、完整度、测序成本及样本要求等四个方面进行了对比。
1、Amelogenin片段是牙釉质蛋白基因的一个片段(X染色体:112bp扩增产物;Y染色体:106bp扩增产物)。 2、Y indel片段,80几碱基的扩增片段。它是Y染色体特有的扩增片段,并且会有2种长度变化。 3、Y染色体特征片段是DYS391片段,Y染色体特有,是一个微卫星DNA片段(STR),有4种长度变化。 简并引物增加对SNP适应性。 3、...
其中长片段PCR主要应用在大片段基因功能研究、多基因簇研究,基因组结构变异分析、大片段合成(比如染色体合成)、高通量测序等多方面。 长片段PCR往往由于模板的复杂性而存在扩增壁垒,已经有一系列技术策略发表来应对长片段难以扩增的问题,比如采用Taq和Pfu的混合酶、或者开发出性能更强的热稳定高保真酶,优化反应体系组成、...
核酸片段长度凝胶电泳图谱法，核酸既含有呈酸性的磷酸基团，又含有呈弱碱性的碱基，故为两性电解质，可发生两性解离。但磷酸的酸性较强，在核酸中除末端磷酸基团外，所有形成磷酸二酯键的磷酸基团仍可解离出一个H+，其pK为1.5；而嘌呤和嘧啶碱基为含氮杂环，又有各种取代基，既有碱性解离又有酸性解离的性质，解离...
Staudinger 偶联法 2000 年,Ronald T.Raines 教授首次用 Staudinger 反应将两条非保护多肽片段连接起来,其反应原理如图所示;施陶丁格反应的两个关键点分别是 N-端必须为有叠氮基团以及 C-端含膦的硫酯,通过反应得到 N-磷叶立德中间体,zuì后水解得到肽键,这个反应具有很强的化学性选择,以至于研究者对施陶丁格反应...
doi : 10.3969/j.issn.l000-4440.2021.05.006一步法快速构建长片段 RNA1 发夹的载体刘廷利 , 郭冬姝 , 姚瑶 , 张保龙( 江苏省农业科学院卓越创新中心 , 江苏南京 210014)摘要 : 利用 RNA 干扰 ( RNA interference, RNAi) 技术可以进行基因功能研究以及作物遗传改良 , 但常规构建 RNAi 载体方法费时费力 。
住所 广东省深圳市盐田区盐田街道北山工业区综合楼 法律状态 2021-06-01 实质审查的生效;2021-05-14 公布 摘要 本发明公开一种长片段核酸测序的方法。利用含有长插入片段以及第一测序接头和第二测序接头的核酸分子,构建测序文库,分段测序,获得长插入片段的核酸序列。新闻...
摘要 本发明提供了一种高效PCR扩增长片段目的序列的方法,步骤为在原有经典PCR程序的基础上,将“退火”这一步骤的反应温度由原有的引物TM值减2~5℃升高至TM值加3~5℃,而将该步骤的时间由原有的30s~60s延长至7~8min。反应程序中的其他条件保持不变。本方法降低了PCR反应对引物的要求,有效提高了反应产物的特异...
此外,长片段dna的合成工艺方法包括生物法合成短链dna、长链dna组装、基因纠错,如何实现这几步反应的高效兼容是生物法合成长片段基因的现有技术瓶颈。因此,迫切需要研究新的技术工艺以克服生物法全合成dna的局限性,以应用于现代分子生物学、基因工程以及合成生物学。