酶标记法亦称免疫酶技术，是以免疫反应为基础，利用免疫反应的高度特异性结合酶的高效催化作用而形成的一整套即有高度特异性，又有较高灵敏度的生物学技术。主要有二个发展方向，一是酶免疫测定技术;另一是酶免疫组织化学染色技术。分别用来检测机体体液中的可溶性抗原与抗体成分以及定位细胞与组织上的抗原或抗体成分。
酶标记物中最常用的是酶标记抗体，它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体，其次要有良好的制备方法。高质量的酶(如辣根过氧化物酶，简称HRP)国内已有商品供应。高质量的抗体则可通过提取纯化而获得。在制备方法上，宜选用产率高、不影响结合物的...
从理论上讲GOD较ALP、HRP为佳,因为哺乳动物组织内不存在内源性GOD,但其分子量较大,具有较多的氨基,在标记时易形成广泛的聚合,影响酶的活性,故GOD主要用于ICC双重染色和两种酶的放大技术。 即用GOD和HRP分别标记第二、第三抗体,以葡萄糖-DAB作显色剂。利用葡萄糖氧化时生成的H2O2作底物,催化酶促反应,不受内源...
抗体标记主要有酶标记、荧光素标记、同位素标记、生物素标记等,还有一些其他的标记方法例如金标记,本文主要讲述了这些抗体标记的基本原理、操作步骤。 一、酶标记 1、辣根过氧化物酶(HRP)标记 辣根过氧化物酶(HRP)标记单抗和多克隆抗体的...
常用的EHSA法有:双抗体夹心法用于测抗原,先将特异抗体包被塑料板,再加入抗原的待检标本,让抗原与固相载体表面包被的抗体结合,洗出未结合的材料,再加入抗同一抗原的酶标记抗体,再洗去未结合的酶标抗体,加底物显色,用ELISA仪器检测颜色光密度,作定量检测,光密度越高,待检样品中含有抗原量越高。 考查要点:免疫...
酶标记液主要作用就是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合，此种结合不会改变抗体的免疫学特性，也不影响酶的生物学活性。产品简介 此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型，出现颜色反应。因此，可通过...
酶标记的抗原或抗体称为结合物(conjugate)。抗原由于化学结构不同,可用不同的方法与酶结合,如为蛋白质抗原,基本上可参考抗体酶标记的方法。制备抗体酶结合物的方法通常有以下几种。 1.戊二醛交联法:戊二醛是一种双功能团试剂,可以使酶与蛋白质或其他抗原的氨基通过它而偶联。戊二醛交联可用一步法(如连接AP),也可...
酶标记的抗原或抗体称为结合物(conjugate)。抗原由于化学结构不同,可用不同的方法与酶结合,如为蛋白质抗原,基本上可参考抗体酶标记的方法。制备抗体酶结合物的方法通常有以下几种。 1.戊二醛交联法:戊二醛是一种双功能团试剂,可以使酶与蛋白质或其他抗原的氨基通过它而偶联。戊二醛交联可用一步法(如连接AP),也可...
酶标抗体法，又名酶联免疫吸附法（ELISA），利用酶标记抗原或抗体以检测相应抗原或抗体的一种免疫学标记技术。其基本原理是使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性，而相对应的抗体或抗原与某种酶连接成酶标抗体或抗原，酶标抗体或抗原既保留了免疫活性可以与固相载体表面的抗原或抗体结合，又保留了酶...