该研究报道了一种以植物主动再生能力为基础的快速、高效的遗传转化方法RAPID（Regenerative Activity-dependent in Planta Injection Delivery），并成功地在甘薯、马铃薯和厚藤中得到应用。在该论文中，作者首先以甘薯为测试对象进行遗传转化体系的开发。将带有节点的甘薯茎切下，用注射器将含有GUS报告基因载体的农杆菌注射...
该研究报道了一种以植物主动再生能力为基础的快速、高效的遗传转化方法RAPID(Regenerative Activity-dependentin PlantaInjection Delivery),并成功地在甘薯、马铃薯和厚藤中得到应用。 在该论文中,作者首先以甘薯为测试对象进行遗传转化体系的开发。将带有节点的甘薯茎切下,用注射器将含有GUS报告基因载体的农杆菌注射到节点...
质粒提取及同源重组:提取空载体质粒,进行酶切连接,然后转入大肠杆菌进行测序。 农杆菌转化:将测序正确的菌液扩繁、保菌后提质粒,转入农杆菌。 建立再生体系 🌱 通过文献查阅或正交试验建立相应外植体的再生体系。如果不需要组织培养,此步可忽略。🌟 转基因操作 准备农杆菌液:取过夜摇好的农杆菌液50ml,室温5000rpm...
遗传转化方法是指通过各种手段将外源DNA引入受体细胞的技术,广泛应用于分子生物学、遗传学和生物技术等领域[1]。根据不同的生物体和实验目的,遗传转化方法可以分为以下几类。 1、化学转化法 (Chemical Transformation) 原理:利用CaCl₂等化学试剂使细菌细胞膜的通透性增加,使外源DNA能够进入细胞内。
遗传转化的目的在于改变生物体的基因组,以获得某种特定的性状或功能。这一技术广泛应用于农业、医学、生物工程等领域。通过遗传转化,可以使植物具有抗病虫害能力、耐逆性和优异的产品特性,从而提高农作物的产量和质量。在医学领域,遗传转化可以用于治疗遗传性疾病和其他疾病,并开发新的药物和治疗方法。 遗传转化的方法多...
遗传转化名词解释 遗传转化,是指同源或异源的游离DNA分子(质粒和染色体DNA)被自然或人工感受态细胞摄取,并得到表达的水平方向的基因转移过程。根据感受态建立方式,可以分为自然遗传转化和人工转化,前者感受态的出现是细胞一定生长阶段的生理特性;后者则是通过人为诱导的方法,使细胞具有摄取DNA的能力,或人为地将DNA导入细胞...
该技术成功提高了多个商业化玉米品种亲本自交系的遗传转化效率，可以实现不依赖玉米基因型的高效遗传转化（图5）。通过郑58、京724等材料的转化测试表明玉米优良自交系的转化效率可以达到11.5%~16.4%（表3）。图4 辅助载体和基因敲除载体示意图(许洁婷等, 2022)。图5 混合转化后的基因型分离检测（A，C）和Waxy...
背景介绍在植物基因工程领域，鉴定遗传转化成功与否是一件费时费力的工作，常用的方法是：种植植物→收集组织样本→制备基因组DNA→PCR检测真核抗性基因或目的基因→判断条带大小是否正确→必要时进行测序。若有简易方法替代这些繁琐的工作，就可以大大减少鉴定的工作量，那么，有哪些方法能够快速判断遗传转化是否成功呢？...
植物遗传转化实验步骤: (1)构建重组质粒:目的基因+线性化载体(限制性内切酶)→大肠杆菌感受态细胞DH5α→质粒提取并验证。 (2)转化农杆菌:将重组质粒转入农杆菌感受态细胞,并进行菌液PCR验证。 (3)农杆菌介导的遗传转化法:将携带目的基因的农杆菌,在含有抗生素的YEP固体培养基上进行复苏后;再含抗生素的液体YEP培养...