逆转录病毒包装步骤: 10cm大皿接种5×106个Plat-E细胞,加入10ml含10%FBS的DMEM培养基过夜,12h后显微镜下观察细胞密度80%-90%为宜。15ug目的质粒和500ulOpti-MEM培养基混合,同时45ug 转染试剂和500ulOpti-MEM培养基混合,5min后转染试剂Opti-MEM加至质粒Opti-MEM中,静置20min,将混合物滴入Plat-E细胞中混匀,3...
病毒包装：将目的质粒和包装质粒混合，加入适量 Opti-MEM 稀释至适当浓度；将混合液加入293T细胞中，同时设置对照组；使用荧光显微镜观察细胞病变现象，病变的细胞表现为细胞增大、圆形、荧光增强等；收集病变细胞，离心后取上清液，即为含有慢病毒的溶液。病毒滴度测定：取适量病毒溶液，稀释至不同浓度；将稀释后的病毒...
逆转录病毒包装步骤: 10cm大皿接种5×106个Plat-E细胞,加入10ml含10%FBS的DMEM培养基过夜,12h后显微镜下观察细胞密度80%-90%为宜。15ug目的质粒和500ulOpti-MEM培养基混合,同时45ug 转染试剂和500ulOpti-MEM培养基混合,5min后转染试剂Opti-MEM加至质粒Opti-MEM中,静置20min,将混合物滴入Plat-E细胞中混匀,3...
准备仪器设备:荧光显微镜。 病毒包装: 将目的质粒和包装质粒混合,加入适量 Opti-MEM 稀释至适当浓度; 将混合液加入293T细胞中,同时设置对照组; 使用荧光显微镜观察细胞病变现象,病变的细胞表现为细胞增大、圆形、荧光增强等; 收集病变细胞,离心后取上清液,即为含有慢病毒的溶液。 病毒滴度测定: 取适量病毒溶液,稀释至...