逆转录reverse transcription:也称反转录以RNA为模板合成DNA的过程,是RNA病毒的复制形式,需逆转录酶的催化。其过程先以经剪切作用除去内含子的成熟mRNA为模板,合成RNA/DNA杂化双链,然后水解RNA链,再以剩下的DNA单链为模板合成DNA双链。多次复制后形成多个DNA双链,然后以这些DNA双链中的每双链的其中的单条(该条与...
逆转录PCR(reverse transcription PCR)或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。技术介绍 由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”,由依赖RNA的DNA聚合酶(逆...
目前提到的逆转录病毒载体通常是指γ-逆转录病毒载体,主要开发于Moloney鼠白血病病毒(Mo-MLV,MMLV)。MMLV是一种简单的γ-逆转录病毒,其基因组包含三个逆转录病毒的三个核心基因:gag、pol和env;核心基因两侧是长末端重复序列(LTR),有助于将病毒基因组整合到宿主基因组中。构建重组MMLV时,为了避免产生具有复...
逆转录病毒即RNA病毒,需在逆转录酶的作用下首先将RNA转变为cDNA,新合成的cDNA插入宿主的核DNA中,随宿主DNA复制、转录、翻译达到扩增目的的一类病毒。逆转录病毒是RNA病毒,它有三个结构蛋白基因:gag-编码病毒衣壳、基质等结构蛋白的基因;pol-编码逆转录酶(p66/p51)、 ...
逆转录病毒(Retrovirus),又称反转录病毒,属于RNA病毒中的一类,它们的遗传信息不是储存在脱氧核糖核酸(DNA),而是储存在核糖核酸(RNA)上。逆转录病毒基因组为二倍体,两条相同的单股正链RNA,其两端为长末端重复序列(LTR),内含有较强启动子和增强子,对病毒DNA的转录调控具有重要作用。病毒核心包含逆转录酶...
具有poly(A)尾部结构的RNA的全长逆转录 大多数RNA种类的逆转录,包括降解RNA oligo(dT)和随机引物的综合优势 目标基因的特异性逆转录 Top 主要反应组分 除酶和引物之外,逆转录的主要反应组分还包括RNA模板(预处理以去除基因组DNA)、缓冲液、dNTP、DTT、RNase抑制剂和无RNase水(...
逆转录病毒(Retrovirus),又称反转录病毒,是一类RNA病毒,需在逆转录酶的作用下首先将RNA转变为cDNA,新合成的cDNA插入宿主的核DNA中,随宿主DNA复制、转录、翻译达到扩增目的。逆转录病毒科可分为7个属:α逆转录病毒属(Alpharetrovirus)、β逆转录病毒属(Betaretrovirus)、γ逆转录病毒属(Gammaretrovirus)、δ...
不可以。逆转录产物cDNA是混合物,除了cDNA产物以外,还有buffer、逆转录酶、引物,同时还包含未转录的模板RNA,总RNA中的tRNA、rRNA等,都会干扰浓度测定结果,因此不能反应真实的cDNA产量。 2 如何检测RNA逆转录成功与否? 1) 内参法:理论上,逆转录的cDNA是长度不同的DNA片段,所以...
逆转录病毒是病毒的一种,指人类疾病。病毒科遗传信息不是存录在脱氧核糖核酸(DNA),而是存录在核糖核酸(RNA)上的。所含基因 1)gag包含组成病毒中心和结构的蛋白质的基因.2)pol包含逆转录酶的基因.3)env包含组成病毒外壳的基因。分类 比较著名的逆转录病毒有艾滋病病毒等。大多数逆转录病毒造成的疾病都是...